一种测定DNA链上嘧啶二聚体含量的方法

摘要

本发明测定DNA链上嘧啶二聚体含量的方法，特征是将末端经生物素修饰的带有一个嘧啶二聚体的探针DNA固定到芯片表面；制备嘧啶二聚体标准品；将0～80nM嘧啶二聚体标准品与0.2～5μg/ml嘧啶二聚体抗体混合，将表面等离子共振传感器检测混合液流过芯片表面的响应值对嘧啶二聚体浓度作图得标准曲线；将待测样品与建立标准曲线相同浓度的抗体混合，检测混合液流过芯片表面的响应值，即可据标准曲线得出样品中嘧啶二聚体的浓度。本发明检测快速，定量准确，重现性好；芯片可以重复使用，检测成本低；可检测的样品范围广；可用于光修复酶活性的检测、研究紫外线对DNA的损伤、DNA损伤修复，及评价臭氧层破坏对人体健康的影响。

主权项

1.一种测定DNA链上嘧啶二聚体含量的方法，其特征在于：先合成一段只含有两个嘧啶碱基处于相邻位置的探针DNA，且其末端经过生物素修饰；经紫外照射使相邻的两个嘧啶碱基形成嘧啶二聚体后，将该探针DNA固定到芯片表面；再合成一段末端不带修饰且只含有两个嘧啶碱基处于相邻位置的单链DNA，用紫外线照射使相邻嘧啶碱基形成嘧啶二聚体之后，经反相高效液相色谱分离得到嘧啶二聚体的标准品；在0～80nM之间取包含边界的五种以上不同浓度的嘧啶二聚体标准品分别与0.2～5μg/ml范围内特定浓度的嘧啶二聚体抗体混合，通过表面等离子共振传感器检测混合液流过芯片表面时产生的响应值，将响应值对嘧啶二聚体浓度作图，得到嘧啶二聚体的标准曲线；将待测样品与建立标准曲线相同浓度的抗体混合，检测混合液流过芯片产生的响应值，将其与标准曲线对照，即可得出样品中嘧啶二聚体的浓度。