来自赤子爱胜蚓的蚯蚓纤溶酶多种组分的制备方法

摘要

本发明公开了蚯蚓纤溶酶多种组分及其分离、纯化、制备工艺，该工艺包括(1)粗分离：蚓激酶粗品过阴离子交换层析柱，得到三个活性峰，D1，D2，D3；(2)精细纯化：D1过阴离子交换层析柱，得到三个活性峰，每个活性峰分别过疏水层析柱得到纯品：EFE-f，EFE-e，EFE-d；D2过疏水层析柱，收集活性峰过阴离子交换层析柱纯化，得到活性组分EFE-a纯品；D3过疏水层析柱得到两个活性峰：D3H1、D3H2，将D3H1过阴离子交换层析柱纯化，得到活性组分EFE-b和EFE-c纯品；将D3H2过疏水层析柱收集活性峰，得到活性组分EFE-g的纯品。本发明的优点是：能系统地获得纯度和活性都较高的蚯蚓纤溶酶的七个组分，可满足实验室规模的制备，经适当放大可适应生产规模的制备。

主权项

1.来自赤子爱胜蚓的蚯蚓纤溶酶多种组分的制备方法，其特征在于该方法包括如下步骤：(1)粗分离：溶解蚓激酶粗品，用HiPrep 16/10 DEAE阴离子交换层析柱进行粗分离，得到三个活性峰，D1，D2，D3；(2)精细纯化：D1过阴离子交换层析柱RESOURCEQ柱，得到三个活性峰：D1RQ1，D1RQ2，D1RQ3，每个活性峰分别过疏水层析柱RESOURCE ISO柱得到纯品：D1RQ1H即EFE-f，D1RQ2H即EFE-e，D1RQ3H即EFE-d；D2过疏水层析柱RESOURCE ISO柱，收集活性峰过强阴离子交换层析柱Mono Q柱纯化，得到一活性组分纯品，即EFE-a；D3过疏水层析柱RESOURCE ISO柱得到两个活性峰：D3H1、D3H2，将D3H1过阴离子交换层析柱Mono Q柱纯化，得到两个活性组分纯品：D3H1M1即EFE-b，D3H1M2即EFE-c；将D3H2过疏水层析柱RESOURCE PHE柱收集活性峰，得到一活性组分的纯品D3H2P1即EFE-g。