发明名称 以电子显微镜观察活体单元之方法
摘要 本发明是有关一种以电子显微镜观察活体单元之方法,包含有下列步骤:A.于一电子显微镜内的样品腔室中提供一活体环境,该活体环境内具有至少一活体单元及预定环境条件,可使该活体单元维持其基本生理功能,且该活体环境具有彼此相对的观视窗,该活体单元具有二种以上的物件分别可承受不同的临界电荷密度;B.以预定强度的粒子束透过该对观视窗照射于该活体单元于预定区域以及预定时间,并于该电子显微镜之成像装置上成像;其中,照射于被观测物件上的电荷密度系小于或等于该活体单元被照射区域中被观测物件的临界电荷密度。藉此可在不损伤活体单元的情形下,以电子显微镜来对活体单元进行观察。
申请公布号 TWI277734 申请公布日期 2007.04.01
申请号 TW094137513 申请日期 2005.10.26
申请人 李炳寰 发明人 赵治宇;谢文俊
分类号 G01N23/00(2006.01) 主分类号 G01N23/00(2006.01)
代理机构 代理人 刘緖伦 台中市南屯区永春东一路549号3楼
主权项 1.一种以电子显微镜观察活体单元之方法,包含有 下列步骤: A.于一电子显微镜内的样品腔室中提供一活体环 境,该活体环境内具有至少一活体单元及预定环境 条件,该环境条件可使该活体单元维持其基本生理 功能,且该活体环境之上下方具有彼此相对的至少 一对观视窗,该活体单元具有二种以上的物件分别 可承受不同的临界电荷密度; B.以预定强度的粒子束透过该对观视窗照射于该 活体单元于预定区域以及预定时间,并于该电子显 微镜之成像装置上成像;其中,该粒子束的预定强 度与该预定时间的乘积即为预定电荷密度,该预定 电荷密度小于或等于该活体单元被照射区域中被 观测物件的临界电荷密度。 2.依据申请专利范围第1项所述之以电子显微镜观 察活体单元之方法,其中:于步骤A.中,在物件承受 的电荷密度超过临界电荷密度时,该物件即失能或 死亡。 3.依据申请专利范围第1项所述之以电子显微镜观 察活体单元之方法,其中:于步骤B.中,系以预定强 度的粒子束透过该对观视窗照射于该活体单元于 预定次数,每次均照射预定区域以及预定时间并成 像。 4.依据申请专利范围第3项所述之以电子显微镜观 察活体单元之方法,其中:于步骤B.中,该等预定次 数照射的电荷密度相加并扣除掉该环境条件所中 和掉的电荷密度后,系小于或等于该活体单元被照 射区域中被观测物件的临界电荷密度;该照射区域 中有二以上之被观测物件时,该相加后的电荷密度 系小于或等于该等被观测物件中可承受最小临界 电荷密度之物件所对应的临界电荷密度。 5.依据申请专利范围第1项所述之以电子显微镜观 察活体单元之方法,其中:该活体单元系为一活体 细胞,或一细菌,或一病毒,或前述单元之组合。 6.依据申请专利范围第5项所述之以电子显微镜观 察活体单元之方法,其中:各该物件系位于该活体 单元内部或表面或外部。 7.依据申请专利范围第5项所述之以电子显微镜观 察活体单元之方法,其中:各该物件系为细胞内的 细胞核或细胞质或胞器或酵素,该胞器系包含染色 体或蛋白质或粒腺体。 8.依据申请专利范围第1项所述之以电子显微镜观 察活体单元之方法,其中:该活体环境系由一盒体 所形成,各该观视窗系为一开口,分别形成于该活 体环境之顶面以及底面。 9.依据申请专利范围第8项所述之以电子显微镜观 察活体单元之方法,其中:该环境条件系为预定压 力之蒸气,或为预定压力之气体,或为预定压力之 液体,或为前述之混合。 10.依据申请专利范围第8项所述之以电子显微镜观 察活体单元之方法,其中:各该观视窗之口径介于5 m -100m之间;各该活体环境更于其外部形成至 少一缓冲层,至少一对外孔分别形成于该缓冲层的 顶部及底部,该对外孔系与该对观视窗同轴。 11.依据申请专利范围第8项所述之以电子显微镜观 察活体单元之方法,其中:至少一该观视窗封设一 层薄膜。 12.依据申请专利范围第1项所述之以电子显微镜观 察活体单元之方法,其中:该粒子束系为电子束或 离子束或原子束或中子束。 13.依据申请专利范围第1项所述之以电子显微镜观 察活体单元之方法,其中:于步骤A.中,该电子显微 镜系为穿透式电子显微镜(TEM-transmission electron microscope),或为扫瞄穿透式电子显微镜(STEM-scanning transmission electron microscope)。 14.依据申请专利范围第13项所述之以电子显微镜 观察活体单元之方法,其中:于步骤A.中,更包含使 用暗视野(Dark Field)成像技术,或能量滤镜或电子能 损谱分析器,藉以撷取预定之粒子来成像,达到较 佳的成像效果。 图式简单说明: 第一图系本发明一较佳实施例之第一操作示意图 。 第二图系本发明一较佳实施例之原理说明图,显示 使用能量滤镜之操作状态。 第三图系本发明一较佳实施例之第二操作示意图 。 第四图系本发明一较佳实施例之活体环境另一结 构示意图。 第五图系本发明一较佳实施例之第三操作示意图 。 第六图系本发明一较佳实施例之第四操作示意图 。
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