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Un método para la detección la presencia o ausencia de una o más enterococos resistentes a la vancomicina en una muestra biológica de un individuo, dicho método comprende: Realizar al menos una etapa de ciclado, en donde una etapa de ciclado comprende una etapa de amplificación y una etapa de hibridización, en donde dicha etapa de amplificación comprende el contacto de dicha muestra con un par de cebadores vanA para producir un producto de amplificación si una molécula de ácido nucleico vanA está presente en dicha muestra, en donde dicha etapa de hibridización comprende el contacto de dicha muestra con un par de sondas vanA, en donde los miembros de dicho par de sondas vanA hibridiza a dicho producto de amplificación entre no más de cinco nucleótidos del uno al otro, en donde una primera sonda vanA de dicho par de sondas vanA se marca con a fracción donador fluorescente y en donde a segunda sonda vanA de dicho par de sondas vanA se marca con una fracción aceptor fluorescente correspondiente; y detección de la presencia o ausencia de transferencia de energía por resonancia de fluorescencia (FRET) entre dicha fracción donador fluorescente de dicha primera sonda vanA y dicha fracción aceptor fluorescente de dicha segunda sonda vanA, en donde la presencia de FRET es indicativo de la presencia de uno o más enterococos resistentes a la vancomicina en dicha muestra biológica, en donde la ausencia de FRET es indicativo de la ausencia de un enterococos resistentes a la vancomicina en dicha muestra biológica, en donde dicho par de cebadores vanA comprende un primer cebador vanA y un segundo cebador vanA, en donde dicho primer cebador vanA comprende la secuencia 5''-CGA GGA CGG ATA CAG GA-3'' (SEQ ID NO: 1), y en donde dicho segundo cebador vanA comprende la secuencia 5''-CTT ATC ACC CCT TTA ACG C-3'' (SEQ ID NO: 2), y en donde dicha primera sonda vanA comprende la secuencia 5''-CAA GAT AAC GGC CGC ATT GTA CTG AAC GA-3'' (SEQ ID NO: 3), y en donde dicha segunda sonda vanA comprende la secuencia 5''-GTC AAT ACT CTG CCC GGT TTC Arc-3'' (SEQ ID NO: 4). |
