一种尼龙亲和膜的制备方法和应用

摘要

本发明公开了一种尼龙亲和膜的制备方法，包括如下步骤：(1)在尼龙膜上化学键合壳聚糖，以降低尼龙膜对蛋白质的非特异性吸附，即得壳聚糖改性的尼龙膜；(2)把壳聚糖改性处理后的尼龙膜与亲和基染料Cibacron Blue F3GA的键合，得到所述尼龙亲和膜；尼龙亲和膜用于分离纯化木瓜蛋白酶。本发明的有益效果是：与传统的膜分离、亲和色谱相比，本发明制备的尼龙亲和膜不仅具有纯化倍数高、压降小，分析时间短、生物大分子在分离过程中变性几率小，允许较快的加料速度等特点，而且比柱亲和色谱更易实现规模化纯化分离。

主权项

1、一种尼龙亲和膜的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)尼龙膜先在0.1-10M盐酸重水解10-72h，然后以10％-25％的戊二醛活化处理，活化后的尼龙膜置于0.5％-5％的壳聚糖溶液中进行化学键合，然后在70-120℃的烘箱中烘干，即得壳聚糖改性的尼龙膜；(2)把壳聚糖改性处理后的尼龙膜2-10g置于浓度为5.0-30mg/ml的50-350mlCibacron Blue F3GA染料溶液中，60℃反应0.5-3h，然后加入20-50ml浓度为20％NaCl溶液，继续反应1.0-3.0h，然后加入5.0-20ml浓度为20％的NaCO3溶液进行固色反应，反应2-10h后，取出，依次以热水，甲醇、2M NaCl，6M尿素，去离子水进行洗涤，得到所述的尼龙亲和膜，4℃保存，备用。