UN METODO DE AMPLIFICACION BASADA EN LA TRANSCRIPCION DE DIANAS DE ADN DE DOBLE HEBRA.

摘要

Método para la amplificación de ADN de doble hebra con un método de amplificación basado en la transcripción, en donde el ADN de doble hebra es puesto en contacto con: - al menos, un oligonucleótido comprendiendo una secuencia complementaria de una parte de la primera de las dos hebras de ADN comprendidas en el ADN de doble hebra, comprendiendo adicionalmente dicho oligonucleótido la secuencia de un promotor reconocido por una ARN polimerasa; - un oligonucleótido adicional comprendiendo una secuencia complementaria de una parte de la segunda hebra comprendida en el ADN de doble hebra; - una enzima poseyendo actividad ADN polimerasa dependiente de ARN; - una enzima poseyendo actividad ADN polimerasa dependiente de ADN; - una enzima poseyendo actividad RNasa H; - una enzima poseyendo actividad ARN polimerasa; y la mezcla de reacción así creada es mantenida bajo las condiciones isotérmicas adecuadas durante una cantidad de tiempo suficiente como para que tenga lugar una reacción de amplificación basada en la transcripción, sin someter la mezcla a ningún tratamiento de calentamiento después de que cualquiera de las enzimas haya sido añadida a la mezcla.