| 主权项 |
1.好氧不产氧光合异养细菌的流式细胞检测方法，其特征在于其步骤为：1)样品准备：在样品中加入终浓度为0.5％～2％的甲醛，2～10℃下避光培养；2)样品染色：吸取至少200μL的样品，利用核酸染料4，6-联脒-2-苯基吲哚对样品进行染色；3)样品的流式细胞分析：将DAPI染色过的样品放置于流式细胞仪的样品台上，利用流式细胞仪对样品进行分析，采集前向散射光、侧向散射光、核酸染料DAPI荧光信号、自养浮游生物的叶绿素荧光信号以及AAPB的细菌叶绿素a的荧光信号等数据，其中，域值设置在DAPI荧光上，利用核酸染料DAPI荧光信号将浮游生物与泥沙、细胞碎屑区分开来，同时，利用红敏检测器采集AAPB的细菌叶绿素a的荧光信号，利用不同浮游生物在AAPB的细菌叶绿素a荧光信号上的差异，将AAPB与其他浮游生物区分开来；4)数据分析：利用流式细胞分析软件对流式细胞仪采集到的数据进行分析，利用核酸染料DAPI荧光信号的强弱，将浮游生物与泥沙、细胞碎屑等区分开来；根据前向散射光及侧向散射光的强弱，将浮游细菌与微型浮游生物区分开来；根据自养浮游生物的叶绿素荧光信号的强弱，排除聚球藻、原绿球藻等对于AAPB检测的影响；而利用AAPB的细菌叶绿素a，将AAPB与其他细菌区分开来，从而获取样品中AAPB的准确数量。 |
