一种非水相中脂肪酶合成酶活力的快速测定方法

摘要

一种非水相中脂肪酶合成酶活力的快速测定方法，属于非水相脂肪酶催化技术领域。本发明是利用脂肪酶在非水相体系中催化对硝基苯酚酯与醇之间的转酯化反应，反应一定时间后，吸取一定体积的反应液用0.1M的NaOH溶液萃取，用比色法于410nm处测定吸光度以确定对硝基苯酚的生成量，一个脂肪酶酶活单位定义为生成1μmol的对硝基苯酚所需的酶量。本发明用于高酯合成活性脂肪酶生产菌的直接筛选，将会得到目的性更强，更适合于非水相催化的脂肪酶生产菌。本发明方法与国际上已有的有关脂肪酶合成酶活力测定与筛选方法相比，无需气相色谱、液相色谱，无需价格昂贵的荧光底物和荧光分光光度计。

主权项

1、一种非水相中脂肪酶合成酶活力的快速测定方法，其特征是利用脂肪酶在非水相体系中催化对硝基苯酚酯与醇之间的转酯化反应，反应5-30分钟后，吸取50μl的反应液用1ml 0.1M的NaOH溶液在比色皿或多孔微孔板中萃取，用比色法于410nm处测定吸光度以确定对硝基苯酚的生成量，一个脂肪酶酶活单位定义为生成1μmol的对硝基苯酚所需的酶量。