一种转印蛋白质的狭缝电转印技术

摘要

本发明公开了一种转印蛋白质的狭缝电转印技术。本发明的技术方案是：首先制备狭缝滤膜；在1×电转缓冲液中浸泡海绵垫、滤纸和电转印用膜到充分湿润；制备凝胶条，并在1×电转缓冲液中漂洗；将海绵垫、滤纸、凝胶条、狭缝滤膜、电转印用膜、滤纸、海绵垫依次平放于电转印装置夹板上，凝胶条在阴极端，电转印用膜在阳极端，组成夹层组合；将电转印夹层组合放入转印槽中，电转印用膜端紧靠正极；然后于1V/cm转印60-70分钟左右；转印结束后立即断开电源，小心拆开装置，在膜上做好所需的标记。这样蛋白质定向定位得比较好，并提高了蛋白质吸附量，提高了免疫印迹检测的灵敏度与特异性，更易判读检测结果，还避免检测结果的错判。

主权项

1.一种转印蛋白质的狭缝电转印技术，其特征在于：a.狭缝滤膜的制备：用75％的酒精将狭缝模板擦洗干净，自然干燥后，将0.45μm厚度的滤膜衬于模板下面，用刀在狭缝模板的狭缝中切割滤膜(4)，在滤膜上切割出狭缝(6)，该狭缝的长度小于电转印用膜的宽度；b.操作方法：将海绵垫(1)、滤纸(2)和电转印用膜(3)分别浸泡在电转缓冲液40-50ml中，持续30-60分钟，保证海绵垫、滤纸和电转印用膜充分的湿润；制备凝胶条，放入电转缓冲液中漂洗1-2分钟；准备电转装置：将电转印用膜(3)、狭缝滤膜(4)和凝胶条(5)紧紧贴牢，并在电转印用膜(3)的外侧和凝胶条(5)的外侧分别置放两层滤纸(2)和一层海绵垫(1)，然后一起平放于电转印装置夹板上，凝胶条(5)在阴极端，电转印用膜(3)在阳极端，构成电转印夹层组合；将电转印夹层组合放入转印槽中，电转印用膜端紧靠正极；然后于1V/cm转印60-70分钟；转印结束后立即断开电源，小心拆开装置，在膜上做好所需的标记。