发明名称 以胺类界面活性剂萃取核酸之方法
摘要 本发明系有关于一种萃取生物检体中核酸之方法,系将生物检体与一含有胺类界面活性剂之试剂进行接触,使生物检体中核酸与胺类界面活性剂形成一错合物,其中胺类界面活性剂系具备如式(I)之通式:R1R2R3N(O)x,式(I);其中,R1与R2分别为氢,含1-6个碳的烷基,含6-12个碳的芳香烃基或是含6-12个碳的烃基芳香烃基;R3为含1-20个碳的烷基、含6-26个碳的芳香烃基或是含6-26个碳的烃基芳香烃基;且x为0或1;胺类界面活性剂存在于试剂中之含量不限,较佳为0.001%至20%之浓度百分比。
申请公布号 TWI275643 申请公布日期 2007.03.11
申请号 TW093140289 申请日期 2004.12.23
申请人 财团法人工业技术研究院 发明人 黄栋梁;林上琪
分类号 C12N15/10(2006.01) 主分类号 C12N15/10(2006.01)
代理机构 代理人
主权项 1.一种萃取一生物检体中核酸之方法,其步骤包括: (a)提供一未处理之生物检体; (b)将该未处理之生物检体与一含有胺类界面活性 剂之试剂进行接触,以使该检体中一核酸与该胺类 界面活性剂形成一错合物,其中该胺类界面活性剂 系具备如下式(I)之通式: R1R2R3N(O)x,式(I), 其中,R1与R2分别为氢,含1-6个碳的烷基,含6-12个碳 的芳香烃基或是含6-12个碳的烃基芳香烃基;R3为含 1-20个碳的烷基、含6-26个碳的芳香烃基或是含6-26 个碳的烃基芳香烃基;且x为0或1;以及 (c)提取出该错合物。 2.如申请专利范围第1项所述之方法,其中该x为1,R1 与R2分别为含1-6个碳的烷基,且R3为含1-20个碳的烷 基。 3.如申请专利范围第1项所述之方法,其中该x为0。 4.如申请专利范围第1项所述之方法,其中该胺类界 面活性剂系选自由下列物质所组成之群组:十二烷 胺(dodecylamine),N-甲基十二烷胺(N-methyldodecylamine),N,N -二甲基十二烷胺(N,N-dimethyldo-decylamine),氧化氮N,N- 二甲基十二烷胺(N,N-dimethyldodecylamine N oxide)以及4- 十四烷胺(4-tetradecylaniline)。 5.如申请专利范围第1项所述之方法,其中该试剂中 所含之该胺类界面活性剂为0.001%至20%之浓度百分 比。 6.如申请专利范围第1项所述之方法,其中该试剂中 更包括至少一种非离子界面活性剂、至少一种酸 性盐类或上述之混合物。 7.如申请专利范围第6项所述之方法,其中该非离子 界面活性剂为聚氧化乙烯类界面活性剂。 8.如申请专利范围第6项所述之方法,其中该非离子 界面活性剂为0.01%至20%之浓度百分比。 9.如申请专利范围第6项所述之方法,其中该非离子 界面活性剂为Tween 20或Triton X-100。 10.如申请专利范围第6项所述之方法,其中该酸性 盐类系选自由下列物质所组成之群组:顺丁烯二酸 ,酒石酸,柠檬酸,草酸,羧酸以及无机酸。 11.如申请专利范围第6项所述之方法,其中该酸性 盐类浓度范围为0.01 M至1M。 12.如申请专利范围第1项所述之方法,其中该试剂 为一液态水溶液。 13.如申请专利范围第12项所述之方法,其中该液态 水溶液之pH値范围在1-10之间。 14.如申请专利范围第1项所述之方法,其中该试剂 系一固态基质。 15.如申请专利范围第1项所述之方法,其中该生物 检体系选自由下列物质所组成之群组:全血液,血 浆,血清,尿液,组织与细胞。 16.一种萃取未处理之生物检体中核酸之试剂,包括 一具备如式(I)之胺类界面活性剂, R1R2R3N(O)x,式(I); 其中,R1与R2分别为氢,含1-6个碳的烷基,含6-12个碳 的芳香烃基或是含6-12个碳的烃基芳香烃基;R3为含 1-20个碳的烷基、含6-26个碳的芳香烃基或是含6-26 个碳的烃基芳香烃基;且x为0或1。 17.如申请专利范围第16项所述之试剂,其中该x为1,R 1与R2分别为含1-6个碳的烷基,且R3为含1-20个碳的烷 基。 18.如申请专利范围第16项所述之试剂,其中该x为0 。 19.如申请专利范围第16项所述之试剂,其中该胺类 界面活性剂系选自由下列物质所组成之群组:十二 烷胺,N-甲基十二烷胺,N,N-二甲基十二烷胺,氧化氮N ,N-二甲基十二烷胺以及4-十四烷胺。 20.如申请专利范围第16项所述之试剂,其中该胺类 界面活性剂为0.001%至20%之浓度百分比。 21.如申请专利范围第16项所述之试剂,其更包括至 少一种非离子界面活性剂、至少一种酸性盐类或 上述之混合物。 22.如申请专利范围第21项所述之试剂,其中该非离 子界面活性剂为聚氧化乙烯类界面活性剂。 23.如申请专利范围第21项所述之试剂,其中该非离 子界面活性剂为0.01%至20%之浓度百分比。 24.如申请专利范围第22项所述之试剂,其中该非离 子界面活性剂为Tween 20或Triton X-100。 25.如申请专利范围第21项所述之试剂,其中该酸性 盐类浓度范围为0.01 M至1M。 26.如申请专利范围第21项所述之试剂,其中该酸性 盐类系选自由下列物质所组成之群组:顺丁烯二酸 ,酒石酸,柠檬酸,草酸,羧酸以及无机酸。 27.如申请专利范围第16项所述之试剂,其中该试剂 为一液态水溶液。 28.如申请专利范围第26项所述之试剂,其中该试剂 之pH値范围在1-10之间。 29.如申请专利范围第16项所述之试剂,其中该生物 检体系选自由下列物质所组成之群组:全血液,血 浆,血清,尿液,组织与细胞。 图式简单说明: 图1系一全血样本经十二烷胺纯化后之核酸电泳结 果。 图2系一全血样本经N,N-二甲基十二烷胺纯化后之 核酸电泳结果。 图3系一全血样本经氧化氮N,N-二甲基十二烷胺纯 化后之核酸电泳结果。 图4系一全血样本经4-十四烷基苯胺纯化后之基因 组DNA电泳结果。
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