用有机溶剂病毒灭活法制备鼠神经生长因子的工艺

摘要

用有机溶剂病毒灭活法制备鼠神经生长因子的工艺，涉及一种鼠神经生长因子的制备工艺，特别是用病毒灭活法制备的工艺。工艺步骤是将小鼠颌下腺组织匀浆，得匀浆上清液，然后离心、去沉淀，上离子交换层析Ⅰ，收集流穿液，流穿液进行酸化解离、离心，得酸解上清液，用注射用水稀释，向其中加入有机溶剂或有机溶剂和去污剂，然后上离子交换层析Ⅱ，收集目标蛋白峰，得收集液，收集液上离子交换层析Ⅲ，即得NGF原液，再加入赋形剂甘露醇和稳定剂白蛋白，经除菌过滤后，分装，冻干得制品。本工艺在传统工艺中加入有机溶剂和去污剂，可有效灭活潜在病毒；加了一道离子交换层析，以利于有机溶剂和去污剂的除去。用本工艺所得制品纯度高、安全性好。

主权项

1、用有机溶剂病毒灭活法制备鼠神经生长因子的工艺，将小鼠颌下腺组织匀浆，得匀浆上清液；然后将匀浆上清液离心、去沉淀后，上离子交换层析I，收集流穿液，流穿液进行酸化解离、离心，得酸解上清液，其特征在于用注射用水稀释酸解上清液至所含蛋白浓度为2.7～3.3mg/ml，向其中加入有机溶剂，有机溶剂终浓度为2.00～2.35％(m/v)，于24～37℃水浴中恒温4～6小时，然后上离子交换层析II，收集目标蛋白峰，得收集液，收集液上离子交换层析III，即得NGF原液，再加入赋形剂甘露醇和稳定剂白蛋白，经除菌过滤后，分装，冻干得制品，离子交换层析III的介质为阳离子交换剂，有机溶剂为磷酸三丁酯。