高比活人α－2b干扰素突变体序列、酵母表达质粒的构建及菌株筛选和纯化方法

摘要

本发明涉及人α－2b干扰素突变体的序列及其分泌表达的酵母菌株IFNα－2b－m/pGAPZα－A/GS115构建的关键技术、构建结果及利用它来生产α－2b干扰素的纯化方法。本发明采用酵母分泌表达系统取代大肠杆菌包涵体表达系统，目标蛋白α－2b干扰素不需要复性，其生物比活性可达到1.0×10⁹单位/毫克蛋白，低毒副作用；在纯化过程中，不需要价值昂贵的单抗柱，即可从发酵液中提取获得纯度达95％以上的目标蛋白α－2b干扰素，降低了生产成本。

主权项

1、一种人α-2b干扰素突变体，具有如下序列GluPheMetCysAspLeuProGlnThrHisSerLeuGlySerArgArgThrLeuMetLeuLeuAlaGlnMetArgArgIleSerLeuPheSerCysLeuLysAspArgHisAspPheGlyPheProGlnGluGluPheGlyAsnGlnPheGlnLysAlaGluThrIleProValLeuHisGluMetIleGlnGlnIlePheAsnLeuPheSerThrLysAspSerSerAlaAlaTrpAspGluThrLeuLeuAspLysPheTyrThrGluLeuTyrGlnGlnLeuAsnAspLeuGluAlaCysValIleGlnGlyValGlyValThrGluThrProLeuMetLysGluAspSerIleLeuAlaValArgLysTyrPheGlnArgIleThrLeuTyrLeuLysGluLysLysTyrSerProCysAlaTrpGluValValArgAlaGluIleMetArgSerPheSerLeuSerThrAsnLeuGlnGluSerLeuArgSerLysGlu。