禽白细胞干扰素的制备方法

摘要

本发明公开了一种禽白细胞干扰素的制备方法，使用鸡新城疫病毒(NDV)作为诱生剂诱导健康禽白细胞，经培养、灭活病毒、除菌、分离、纯化等工艺，制成禽白细胞干扰素冻干粉针剂。本发明成功利用了禽新鲜全血作为原料，制备工艺简便及经冻干后易运送和保藏，产品质量可靠。禽白细胞干扰素注射禽机体后，具有疗效好、安全可靠和无毒副作用等特点。可用于治疗禽流感、新城疫、禽传染性支气管炎、小鹅瘟、鸭瘟等病毒性疾病。

主权项

1、禽白细胞干扰素的制备方法，其特征在于：(1)、以800rpm～2500rpm离心装有禽新鲜抗凝血瓶30min，收集血灰黄层，得到富含禽全血白细胞悬液，用已预温的培养液将细胞悬液浓度稀释成1×107/ml细胞悬液；(2)、在已稀释好的细胞悬液中加入少量粗纯制禽白细胞干扰素，使其最终浓度为100单位/ml，置于37℃水浴摇床搅拌培养2小时；(3)、在启动后的禽白细胞悬液中加入NDV，使其最终浓度为100～150血凝单位/ml，并同时在白细胞悬液中加入原全血1～1.5倍体积量的含10％禽血清或禽血浆的RPMI 1640营养液，加入终浓度为10μg/ml的卡那霉素，调悬液酸碱度至pH7.4，37℃摇床搅拌培养18～24小时；(4)、经2000rpm～3000rpm离心30min，取上清液，加入6N HCl调至pH 2.0，置4℃4～5天，每日振摇2～3次，再用6N NaOH调至pH7.2，即得到禽白细胞干扰素粗制品。