主权项 |
1、一种用于人胚胎肾(HEK)293细胞培养的无血清培养基,由氨基酸、维生素、无机盐和其它部分组成,其特征在于,所说的无血清培养基包括如下组分及含量:氨基酸部分:L-丙氨酸 0~30mg/LL-精氨酸 50~300mg/LL-谷氨酸 10~150mg/LL-天冬酰胺 10~200mg/LL-天冬氨酸 20~300mg/LL-半胱氨酸 20~300mg/LL-胱氨酸 50~600mg/LL-甘氨酸 0~50mg/LL-组氨酸 40~700mg/LL-异亮氨酸 50~700mg/LL-亮氨酸 80~1200mg/LL-赖氨酸 90~1500mg/LL-甲硫氨酸 20~400mg/LL-苯丙氨酸 30~500mg/LL-脯氨酸 0~50mg/LL-苏氨酸 50~600mg/LL-色氨酸 10~200mg/LL-酪氨酸 50~800mg/LL-缬氨酸 50~700mg/LL-谷氨酰胺 100~9000mg/L维生素部分:生物素 0.001~0.01mg/L氯化胆碱 5~20mg/L泛酸钙 2~10mg/L叶酸 0~5mg/L肌醇 5~20mg/L维生素B1 2~10mg/L维生素B2 0.1~0.5mg/L维生素B6 2~10mg/L维生素B12 0.2~1.0mg/L烟酰胺 2~5mg/L无机盐部分:柠檬酸铁 5~20mg/LNaF 2~20mg/LFe(NO3)3.9H2O 2~10mg/LFeSO4.7H2O 5~20mg/LKCl 200~500mg/LMgCl2 20~50mg/LCuSO4.5H2O 0.001~0.01mg/LCaCl2 2~200mg/LNa2HPO4.2H2O 50~100mg/LNaH2PO4.2H2O 50~100mg/L亚硒酸钠 0.005~0.05mg/LNaHCO3 2000mg/LNaCl 6999.5mg/L其它部分:葡萄糖 2000~5000mg/L胰岛素 2~20mg/L转铁蛋白 2~20mg/L聚乙二醇 2~10mg/LPrimatone 1000~5000mg/L类脂混合物 0.1v/v%~0.5v/v%氢化可的松 0.05~0.5mg/LHEPES 1000~5000mg/LPluronic F-68 1~10g/L葡聚糖 10~100mg/L还原型谷胱甘肽 0~3mg/L其中:所说的类脂混合物为GIBCO公司生产的化学成分确定的脂质,其组成如下花生四烯酸 2mg/L1 胆固醇 220mg/L1 DL-醋酸α-生育酚 70mg/L1 亚油酸 10mg/L1 亚麻酸 10mg/L1 豆蔻酸 10mg/L1 油酸 10mg/L1 棕榈烯酸 10mg/L1 棕榈酸 10mg/L1 硬脂酸 10mg/L1 吐温80 2200mg/L1 Pluronic F-68 100000mg/L1 L为所说无血清培养基的总体积,L1为所说类脂混合物的总体积算,所用聚乙二醇的分子量为20000。 |