葛藤的组培快繁苗木生产方法

摘要

本发明公开了葛藤[美国葛藤(pueraria montanaMerr)、葛藤(pueraria lobata Ohwi)、粉葛(pueraria lobata Ohwivar.thomsoni van der Maesen)]快捷且增殖速度快的无性繁殖和脱毒苗木生产方法，该方法利用葛藤的茎段为外植体，进行组织培养脱毒苗木生产，在MS基本培养的基础上，添加有机营养物质、生长素类物质，来诱导丛生芽分化以达到快速增殖、再诱导丛生芽生根、最后出瓶驯化的整个繁殖过程；其操作流程为：1)外植体的选择；2)培养基的制备；3)外植体预处理，消毒；4)初代培养；5)增殖培养；6)诱导生根；7)练苗及出瓶驯化。其培养条件为：每日光照10h～12h；温度为25℃±2℃。本发明可以使每株葛藤在工厂化育苗条件下，一年内繁育成上百万株成品和脱毒苗木，大大提高葛藤的繁育苗木效率。

主权项

1.葛藤(美国葛藤(pueraria montana Merr)、葛藤(pueraria lobata Ohwi)、粉葛(pueraria lobata Ohwi var.thomsoni van der Maesen))的组培快繁苗木生产方法，利用葛藤的外植体进行组培快繁苗木生产，其特征在于，在MS基本培养的基础上，添加有机营养物质、生长素类物质，来诱导丛生芽分化以达到快速增殖、再诱导丛生芽生根、最后出瓶驯化的整个繁殖过程；其具体操作步骤为：1)外植体的选择采集当年生葛藤的幼茎，将其切成带芽小段；2)培养基的制备培养基为MS培养基，并分为初代培养基、增殖培养基和生根培养基；其配方分别为：初代培养基：MS+6-苄基腺嘌呤(BA)0.5mg/L+萘乙酸(NAA)0.3mg/L；蔗糖浓度为3％，琼脂浓度0.55％，PH值为5.8；增殖培养基：MS+6-苄基腺嘌呤(BA)(0.5-1.0)mg/L+萘乙酸(NAA)(0.1-0.3)mg/L，蔗糖浓度为3％，琼脂浓度0.55％，PH值为5.8；生根培养基：MS+萘乙酸(NAA)0.05mg/L；蔗糖浓度为3％，琼脂浓度0.55％，PH值为5.8；按照上述配方配制后消毒后待用；3)外植体预处理、消毒用去污粉清洗后用0.1％的HgCl消毒8分钟，再用无菌水冲洗3～4次，浸在蒸馏水中备用；4)初代培养在超净工作台上，将消过毒的外植体，即带腋芽茎段切成1cm左右的片段，接种于初代培养基中，置于光照培养室培养，每日光照10h～12h，温度为25℃±2℃条件下培养；5)增殖培养将初代培养的丛生芽，在超净工作台上切成小段，接种在增殖培养基上，继续扩大繁殖；6)生根培养扩繁后，挑选生长健壮的丛生芽，接种在生根培养基上，置于光照培养室培养，每日光照10h～12h，温度为25℃±2℃条件下培养，培养30天左右生根；7)练苗及出瓶驯化将以丛生芽已生根的培养瓶盖打开，继续在培养室练苗3天，然后，取出生根苗，冲洗净根部，移植到装有已消毒土壤的育苗容器中，置在温室或大棚中，开始保持每日光照10h～12h，温度为25℃±2℃，适应后，逐渐调整光照、温度条件接近室外，经常通风，按时浇水，每2～3天一次，保持土壤湿润至生长到苗高20cm左右，为组培成品苗出圃移栽。