耐热菌的QC－PCR快速定量检测所用竞争模板的制备方法

摘要

本发明公开了一种耐热菌的QC－PCR快速定量检测所用竞争模板的制备方法，其特征是按以下步骤进行：捕集目标菌进行DNA的提取→竞争模板引物设计→竞争模板的PCR扩增→凝胶电泳检测→回收竞争模板→测定回收的竞争模板浓度。本发明以50μLPCR体系，使用引物1、引物3，PCR得到除比目标模板(298bp)中间少51bp外，其它部分相同的竞争模板(247bp)，再用DNA分离纯化试剂盒可分离纯化获得所需竞争模板，经竞争模板与目标模板共扩增，当竞争模板与目标模板浓度相近时，二者具有相近的扩增效率，且两者扩增产物能够在凝胶电泳上清楚地分开，本法所制备的竞争模板可成功地用于QC－PCR对耐热菌的快速定量检测。

主权项

1.耐热菌的QC-PCR快速定量检测所用竞争模板的制备方法，其特征是操作步骤如下：捕集目标菌进行DNA的提取→竞争模板引物设计→竞争模板的PCR扩增→凝胶电泳检测→回收竞争模板→测定回收的竞争模板浓度。