一种病原菌多重PCR检测试剂盒及其检测方法

摘要

本发明是针对奶牛乳房炎主要病原菌金黄色葡萄球菌、无乳链球菌、停乳链球菌和大肠杆菌16S－23S rRNA区间，合成4对相应的特异扩增引物，应用多重PCR反应体系对奶牛乳房炎病原菌进行检测。扩增片段的长度分别为无乳链球菌162bp、停乳链球菌264bp、金黄色葡萄球菌439bp和大肠杆菌544bp。该多重PCR检测试剂盒和检测方法特异性强、敏感。能够同时对四种病原菌进行检测和鉴定，从而达到降低PCR诊断的工作量和成本的目的。

主权项

1、一种病原菌PCR检测试剂盒，其特征在于它含有如下引物：(1)检测金黄色葡萄球菌的引物：上游引物5’AAG GAT ATA TTC GGA ACA TCT 3’下游引物5’TAA GTC AAA CGT TAA CAT ACG 3’(2)检测无乳链球菌的引物：上游引物5’GCT AGG CTC CAT TGA ATC 3’下游引物5’TTA ACC TAG TTT CTT TAA AAC TAG AA 3’(3)检测停乳链球菌的引物：上游引物5’GAA CAC GTT AGG GTC GTC 3’下游引物5’AGT ATA TCT TAA CTA GAA AAA CTA TTG 3’(4)检测大肠杆菌的引物：上游引物5’AAG AAG CTT GCT TCT TTG CTG 3’下游引物5’GAG CCC GGG GAT TTC ACA T 3’。