发明名称 万古霉素的纯化方法
摘要 本发明提供一从含有万古霉素的微生物发酵培养液纯化万古霉素的方法,包括依序将含有万古霉素的微生物发酵培养液通过一强酸阳离子交换树脂、一弱硷阴离子交换树脂、氧化铝与厌水性吸收树脂。
申请公布号 TWI270575 申请公布日期 2007.01.11
申请号 TW094113386 申请日期 2005.04.27
申请人 CJ股份有限公司 发明人 李柱元;郑允泽;徐挺宇;李广燮
分类号 C12M1/12(2006.01) 主分类号 C12M1/12(2006.01)
代理机构 代理人 詹铭文 台北市中正区罗斯福路2段100号7楼之1;萧锡清 台北市中正区罗斯福路2段100号7楼之1
主权项 1.一种从含有万古霉素的微生物发酵培养液中纯 化盐酸万古霉素的方法,包括: 将含有万古霉素的微生物发酵培养液通过一酸硷 値(pH)介于1-3之强酸阳离子交换树脂后再以酸硷値 (pH)介于9-11浓度介于0.05到0.2N的氨水溶液洗提出万 古霉素; 调整洗液酸硷値(pH)介于3-5;再将前述溶液通过一 弱硷阴离子交换树脂并继续通过氧化铝,之后再水 洗弱硷阴离子交换树脂与氧化铝以便洗提出万古 霉素;最后再将粗万古霉素去色; 将洗液通过厌水性吸收树脂且使用碳数C1-4的醇类 水溶液洗提出万古霉素1;以及 并加入盐酸以调整洗液的酸硷値(pH)介于2-5并加入 一水溶性有机溶剂,且前述水溶性有机溶剂选自由 含有碳数Cl-4的醇类、乙(acetonitrile)、丙酮与甲 基异丁酮(methyl isobutyl ketone)所组成之族群做为洗 液洗提析出盐酸万古霉素结晶。 2.如申请专利范围第1项所述之从含有万古霉素的 微生物发酵培养液中纯化盐酸万古霉素的方法,其 中所述之微生物为东方土壤丝菌(Amycolatopsis orientalis(ATCC 19795)。 3.如申请专利范围第1项所述之从含有万古霉素的 微生物发酵培养液中纯化盐酸万古霉素的方法,其 中所述之强酸阳离子交换树脂为DOWER 50WX2-100(筛孔 为50-100 mesh,一种树脂(sulfone resin),可向Dow Chemical 购得)。 4.如申请专利范围第1项所述之从含有万古霉素的 微生物发酵培养液中纯化盐酸万古霉素的方法,其 中所述之弱硷阴离子交换树脂为DCA11【一种多孔 径丙烯酸树脂(porous acrylic resin),可由Mitsubishi购得 】。 5.如申请专利范围第1项所述之从含有万古霉素的 微生物发酵培养液中纯化盐酸万古霉素的方法,其 中所述之用以洗提出万古霉素且用以加入水溶性 有机溶剂之含有碳数C1-4的醇类,该含有碳数C1-4的 醇类选自由甲醇、乙醇、与异丙醇所组成的族群 。 6.如申请专利范围第1项所述之从含有万古霉素的 微生物发酵培养液中纯化盐酸万古霉素的方法,其 中所述之厌水性吸收树脂是Amberchrom CG-161M(可从 Rohm & Haas购得)。 7.如申请专利范围第1项所述之从含有万古霉素的 微生物发酵培养液中纯化盐酸万古霉素的方法,其 中更包括混合由活性碳去色的洗液,再经过滤产生 的混合物。 8.如申请专利范围第1项所述之从含有万古霉素的 微生物发酵培养液中纯化盐酸万古霉素的方法,其 中更包括浓缩洗液以获得使用有碳数C1-4的醇类之 水溶液洗提出的万古霉素。 图式简单说明: 图1描述一实施例运用本发明方法之所纯化之盐酸 万古霉素的高压液态层析仪测试(HPLC)结果。 图2描述从日本礼来药厂购得之盐酸万古霉素的高 压液态层析仪测试(HPLC)结果(使用欧洲抗生素标准 )。
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