发明名称 检测基因改造玉米之质体
摘要 本发明系关于一种质体,其包括一启动子,一玉米内部对照基因及基因改造玉米品系Bt11、Event176、GA21、MON810、NK603、T25及TC1507之殖入基因:除此,亦包括引子、探针、即时PCR(real-time PCR)反应溶液配方与即时PCR条件。
申请公布号 TWI269809 申请公布日期 2007.01.01
申请号 TW092134356 申请日期 2003.12.05
申请人 行政院卫生署药物食品检验局 发明人 阙丽卿;陈育志;崔秀炜;施养志;陈树功
分类号 C12N15/29(2006.01) 主分类号 C12N15/29(2006.01)
代理机构 代理人 陈长文 台北市松山区敦化北路201号7楼
主权项 1.一种质体,其包括一启动子,一玉米内部对照基因 及下列核酸序列:序列辨识编号:1,序列辨识编号:2, 序列辨识编号:3,序列辨识编号:4,序列辨识编号:5, 序列辨识编号:6及序列辨识编号:7。 2.根据申请专利范围第1项之质体,其中该启动子为 CaMV 35S启动子。 3.根据申请专利范围第1项之质体,其中该玉米内部 对照基因为玉米淀粉合成酵素IIb(maize starch synthase IIb)基因,转化酵素(invertase)基因或高移动群蛋白 质(high mobility group,HMG)基因。 4.根据申请专利范围第1项之质体,其中该玉米内部 对照基因为高移动群蛋白质(HMG)基因。 5.根据申请专利范围第1项之质体,其中该启动子为 CaMV 35S启动子及该玉米内部对照基因为HMG。 6.一种载体,其包括申请专利范围第1或2项之质体 。 7.一种宿主细胞,其包括申请专利范围第6项之载体 。 8.根据申请专利范围第1项之质体,其可用于检测基 因改造玉米品系Btl1、Event176、GA21、MON810、NK603、T 25及TC1507。 9.一种杂交至Btl1基因序列之探针,其由序列辨识编 号:8之序列组成。 10.一种杂交至GA21基因序列之引子对,其序列分别 为序列辨识编号:9及序列辨识编号:10。 11.一种杂交至GA21基因序列之探针,其系由序列辨 识编号:11之序列组成。 12.一种杂交至MON810基因序列之引子,其系由序列辨 识编号:12之序列组成。 13.一种杂交至MON810基因序列之探针,其系由序列辨 识编号:13之序列组成。 14.一种杂交至NK603基因序列之引子对,其序列分别 为序列辨识编号:14及序列辨识编号:15。 15.一种杂交至NK603基因序列之探针,其系由序列辨 识编号:16之序列组成。 16.一种杂交至T25基因序列之引子对,其序列分别为 序列辨识编号:17及序列辨识编号:18。 17.一种杂交至T25基因序列之探针,其系由序列辨识 编号:19之序列组成。 18.一种杂交至TC1507基因序列之引子对,其序列分别 为序列辨识编号:20及序列辨识编号:21。 19.一种杂交至TC1507基因序列之探针,其系由序列辨 识编号:22之序列组成。 20.一种杂交至CaMV 35S启动子之引子对,其序列分别 为序列辨识编号:23及序列辨识编号:24。 21.一种杂交至CaMV 35S启动子之探针,其系由序列辨 识编号:25之序列组成。 22.一种杂交至玉米高移动群蛋白质(high mobility group,HMG)基因序列之引子对,其序列分别为序列辨 识编号:26及序列辨识编号:27。 23.一种检测基因改造玉米品系之方法,其系使用如 申请专利范围第1项之质体及一或多种如申请专利 范围第9项至第22项所列之引子及探针。 24.一种检测基因改造玉米品系之套组,其包括根据 申请专利范围第1项之质体,一或多种专一性杂交 至Btl1、GA21、MON810、NK603、Event176、T25及TC1507基因 改造玉米转殖品系之引子及探针,如申请专利范围 第20项之引子,如申请专利范围第21项之探针,如申 请专利范围第22项之引子,及即时PCR反应溶液配方 。 25.根据申请专利范围第24项之套组,其中专一性杂 交至Btl1、GA21、MON810、NK603、T25及TC1507基因改造玉 米转殖品系之探针分别如申请专利范围第9、11、 13、15、17及19项所列。 26.根据申请专利范围第24项之套组,其中专一性杂 交至GA21、MON810、NK603、T25及TC1507基因改造玉米转 殖品系之引子分别如申请专利范围第10、12、14、 16及18项所列。 图式简单说明: 图1为本发明pBFDAM2质体之构筑步骤。 图2为本发明pBFDAM2质体中之基因顺序。 图3为本发明pBFDAM2质体中之各基因顺序及其序列 图4为构筑pBFDAM2质体之DNA序列,引子及探针位置。
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