湖泊沉积物中微生物总DNA的提取及生物量的鉴定方法

摘要

本发明公开了一种湖泊沉积物中微生物总DNA的提取及生物量的鉴定方法，首先抽取部分样品冷冻干燥计算样品含水率；沉积物样品加入提取缓冲液以及SDS裂解，离心、去除腐质酸和多糖，沉淀分离得到单细胞；收集上清液加入高盐和阳离子去污剂消化，提抽；向上述水相中加入萃取剂沉淀，冷乙醇洗涤，临界干燥；最后对粗提液处理，紫外测定OD_260nm/OD_280nm吸光度，定量计算微生物总DNA以及单位沉积物生物量。本发明直接提取总DNA，整个过程简单、不需要花费贵重的药品，比较经济、实用。本发明特别适用于湖泊沉积物中微生物总DNA的提取及生物量的鉴定方法。

主权项

1、一种湖泊沉积物中微生物总DNA的提取及生物量的鉴定方法，其特征在于它包括如下步骤：(1)抽取沉积物样品冷冻干燥，并计算样品含水率；(2)配制核酸提取缓冲液，加入十二烷基磺酸钠混匀，将沉积物样品加入混合液中，裂解，离心，去除腐质酸和多糖，沉淀分离得到单细胞；(3)收集上清液加入高盐和阳离子去污剂十六烷基三甲基溴化铵消化，采用氯仿和异戊醇混合液提抽；(4)向上述步骤水相中加入萃取剂沉淀，并用醇类洗涤，临界干燥；(5)透析带电洗脱纯化回收对粗提液处理，紫外测定OD260nm/OD280nm吸光度，定量计算微生物总DNA以及单位沉积物生物量。