一种提取细菌mRNA的方法

摘要

本发明公开了一种新的提取细菌mRNA的方法，该方法是先设计针对5S、16S和23S rRNA的保守序列寡核苷酸探针，并进行生物素标记，标记的探针加入到包被链霉亲和素的顺磁颗粒中，再加入细菌总RNA提取液，5S、16S和23S rRNA与探针特异性杂交，形成的复合体被结合在固相上，使mRNA留在液相中，分离吸附复合体，收集上清，进行核酸沉淀，洗涤，即得富集的mRNA。

主权项

1.一种提取细菌mRNA的方法，其特征在于该方法包括如下步骤：首先，分别设计针对5S、16S和23S rRNA的保守序列寡核苷酸探针，并在合成探针时进行生物素标记；针对5S rRNA的保守序列寡核苷酸探针是CP-1，核苷酸序列号为SEQ No.1；针对16S rRNA的保守序列寡核苷酸探针是CP-2，CP-3，CP-4，核苷酸序列号分别为SEQ No.2、SEQ No.3和SEQ No.4；针对23S rRNA的保守序列寡核苷酸探针是CP-5，CP-6，CP-7，CP-8，CP-9，核苷酸序列号分别为SEQ No.5、SEQ No.6、SEQ No.7、SEQ No.8和SEQ No.9；然后，将生物素标记的探针加入到包裹着链霉亲和素的顺磁颗粒中，将探针和磁珠结合在一起；再加入细菌总RNA溶液，其中的5S、16S和23S rRNA与磁珠结合的生物素标记的寡核苷酸探针特异性杂交，形成的复合体被顺磁颗粒捕获，结合在固定相上，使mRNA留在液相中；用一个磁分离架吸附复合体，收集上清，然后再进行核酸沉淀，洗涤，即得富集的mRNA。