快速检测细小脲原体的荧光定量PCR试剂盒

摘要

本发明公开了一种快速检测细小脲原体的荧光定量PCR试剂盒，涉及一种性传播疾病病原体基因检测技术，适用于细小脲原体定性定量检测。本发明由DNA裂解液、荧光定量PCR反应液、标准阳性模板pU－UP、阴性质控标准品组成；荧光定量PCR反应液含有细小脲原体特异性引物对和荧光探针。本发明特异性好，灵敏度高，定量精确，快速简便，可重复性高，可以对细小脲原体的全部4个血清型进行定性定量检测，可以替代传统的培养法，同时该试剂盒可以用于鉴别区分细小脲原体和解脲脲原体。

主权项

1、一种快速检测细小脲原体的荧光定量PCR试剂盒，其特征在于：由DNA裂解液、荧光定量PCR反应液、标准阳性模板pU-UP、阴性质控标准品组成；荧光定量PCR反应液含有细小脲原体特异性引物对和荧光探针；正向引物为5′-CATTGATGTTGCACAAGGAGAAA-3′，反向引物为5＇- TTAGCACCAACATAAGGAGCTAAATC-3′；荧光探针序列为5′-TTGACCACCCTTACGAG-3′，荧光探针5′端标记报告荧光基团FAM，3′端标记不发光的淬灭基团标记，并连接小型凹槽结合物-MGB基团，标准阳性模板pU-UP是含有细小脲原体高度保守基因-脲酶基因的111个碱基对的核苷酸片段构成的pUCm-T载体，该载体在大肠杆菌DH5α中增殖；所述的PCR即聚合酶链式反应，所述的UP即细小脲原体。