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<p>"MéTODO PARA A PRODUçãO DE UMA PROTEìNA, MéTODO PARA A PURIFICAçãO DE UM HORMÈNIO DE CRESCIMENTO RECOMBINANTE DO LEITE DE UM MAMìFERO TRANSGêNICO NãO HUMANO QUE PRODUZ UM HORMÈNIO DE CRESCIMENTO RECOMBINANTE E MéTODO PARA A PURIFICAçãO DE UM HORMÈNIO DE CRESCIMENTO RECOMBINANTE DO LEITE DE UM MAMìFERO NãO TRANSGêNICO QUE PRODUZ UM HORMÈNIO DE CRESCIMENTO RECOMBINANTE". A invenção refere-se a um método para a produção de uma proteína de interesse, o qual compreende a produção de um mamífero transgênico não humano que produz a dita proteína em seu leite, a obtenção do dito leite do mamífero transgênico não humano, e a purificação da dita proteína de interesse do leite. Foram gerados animais bovinos transgênicos, os quais têm capacidade de produzir o hormónio de crescimento humano nas glândulas mamárias. O método envolve a clonagem de um construto genético que codifica um gene de hGH e um promotor de beta caseína convenientemente em um vetor de expressão. Ele também inclui procedimentos de transfecção em células somáticas de fetos de bovinos, geralmente fibroblastos, e a transferência nuclear para oócitos de bovino enucleados, dessa maneira gerando embriões transgênicos. O método também inclui outros procedimentos para a geração de embriões transgênicos para uma expansão maior do rebanho transgênico, tal como a subclonagem de fêmeas bovinas transgênicas, a superovulação de vacas transgênicas e a sua inseminação com sêmen ou de um macho bovino transgênico ou não transgênico, e a superovulação de vacas não transgênicas e a sua inseminação com sêmen de machos bovinos transgênicos. Em seguida, os embriões transgênicos resultam em gado transgênico que produz o hormónio do crescimento humano em grandes quantidades em seu leite, do qual o hormónio é completamente purificado e analisado para preencher todos os requisitos para a manufatura de um produto biofarmacêutico puro.</p> |
