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Un método para aislar y caracterizar un receptor unido a membrana junto con su microentorno; tal método comprende (a) proporcionar un soporte sólido acoplado a un ligando que una específicamente dicho receptor, en el que dicho ligando es un agente de unión afín distinto de lectina; (b) tratar dicho soporte sólido con una muestra que comprende células nucleadas u orgánulos de las mismas que comprenden dichos receptores unidos a membrana, y tales células u orgánulos no se han tratado en su superficie, en el que se forma un complejo entre dicho receptor unido a membrana y el ligando, generando de este modo un complejo ligando/receptor que comprende el receptor y su microentorno, tal complejo está acoplado al soporte sólido a través del ligando; (c) separar el soporte sólido del resto de la muestra; (d) someter al soporte sólido separado a una fuerza suficiente para disociar el receptor y su microentorno de la membrana, pero insuficiente para romper el complejo ligando/receptor; obteniendo de este modo el soporte sólido acoplado a un complejo ligando/receptor por medio del cual el receptor retiene su microentorno, pero se separa de la membrana; (e) obtener dicho complejo ligando/receptor aislado al eliminar el complejo ligando/receptor que comprende el receptor y su microentorno del soporte sólido; y, opcionalmente, (f) analizar el microentorno del receptor. |
