ENSAYO REDOX CON QUIMIOLUMINISCENCIA PARA CUANTIFICAR ANALITOS EN MUESTRAS BIOLOGICAS.

摘要

Un método para determinar la concentración de un analito en una muestra biológica, excluyendo métodos practicados en el cuerpo de un ser humanos o animal, que comprende las etapas de: (a) combinar la muestra biológica, al menos una enzima deshidrogenasa para el analito de interés, y un dinucleótido de nicotinamida y adenina para formar una mezcla de reacción, e introducir adicionalmente un marcador quimioluminiscente seleccionado entre derivados de luminol y derivados de acridina en la mezcla de reacción al mismo tiempo o en una etapa diferente durante o antes de la etapa (b); (b) permitir que el analito experimente una reacción de oxidación-reducción y el dinucleótido de nicotinamida y adenina se convierta en la forma reducida del dinucleótido de nicotinamida y adenina y permitir adicionalmente que el marcador quimioluminiscente reaccione con la forma reducida del dinucleótido de nicotinamida y adenina mediante lo cual se evita la activación quimioluminiscente del marcador; (c) realizar laactivación quimioluminiscente del marcador quimioluminiscente que no ha reaccionado con la forma reducida del dinucleótido de nicotinamida y adenina empleando peróxido alcalino para provocar que reaccione el marcador quimioluminiscente con un nucleófilo, permitiendo de este modo la formación de un compuesto que emite luz; y (d) determinar la concentración del analito de interés en una muestra biológica correlacionando la cantidad de luz emitida con la concentración de la forma reducida del dinucleótido de nicotinamida y adenina.