一种c－FLIP反义寡核苷酸纳米粒的制备方法

摘要

本发明涉及医药技术领域，是一种c－FLIP反义寡核苷酸纳米粒的制备方法。本发明采用复乳－干燥法制备c－FLIP反义寡核苷酸纳米粒制剂。将适量c－FLIP－ASODN(600μg)溶于超纯水中，作为水相；将适量聚乳酸－羟基乙酸共聚物(PLGA RG503H)溶于二氯甲烷中，作为油相；将水相与油相混合，冰浴条件下超声乳化形成初乳；取泊洛沙姆188(Poloxamer188)溶液加至初乳中，冰浴条件下再次超声乳化得到复乳；将复乳加至聚乙烯醇(PVA)溶液中，室温下低速搅拌挥发有机溶剂，然后用离心收集沉淀，水洗后，制成冻干粉即可。本发明制备方法所得的纳米粒粒径分布范围窄，平均粒径小，载药量大，有机溶剂挥发较彻底，吸附的PVA少，使用更为安全。

主权项

1.一种c-FLIP反义寡核苷酸纳米粒的制备方法，按如下比例操作：(1)制备油相：将聚乳酸-羟基乙酸共聚物15-80mg溶于有机溶剂二氯甲烷0.5-2.4ml制成油相；(2)制备内水相：将c-FLIP反义寡核苷酸330-1650μg溶于缓冲液75-350μl形成内水相，缓冲液为PH＝7.4的PBS或TE缓冲液；(3)制备纳米粒：将内水相加入上述油相冰浴超声乳化形成初乳，将0.1％-5％泊洛沙姆188水溶液加入至初乳，继续冰浴超声乳化，形成复乳，将复乳倒入0.2-0.6％聚乙烯醇水溶液中，室温下以300-600rpm继续搅拌形成纳米粒，水洗后，离心收集沉淀，冷冻干燥即可得纳米粒干粉制剂。