发明名称 生物大分子组分相分离法
摘要 本发明涉及一种生物大分子组分相分离法,对需要分离的物质预处理后1)凝集:加足够量的缓冲溶液(硫酸铵,氯化铯,硫酸钠,乙二胺四乙酸中的一种)温和混匀;2)分相:加分相溶液(乙醇,异丙醇,异丁醇,丙酮中的一种或几种的混合物)温和混匀,离心,成上下两相;其中脂质在上相,蛋白质在相间沉淀,DNA质粒、病毒核酸、线粒体DNA在下相,总RNA在下相沉淀;基因组DNA或在下相或与蛋白质在相间共沉淀。本发明分离技术的组分得率和纯度高,为这些组分的纯化提供了便利的条件。
申请公布号 CN1283792C 申请公布日期 2006.11.08
申请号 CN200310108649.7 申请日期 2003.11.14
申请人 余伟明 发明人 余伟明
分类号 C12N15/10(2006.01);C12N1/02(2006.01);C12P7/64(2006.01);C07K1/14(2006.01);C07H1/06(2006.01) 主分类号 C12N15/10(2006.01)
代理机构 杭州杭诚专利事务所有限公司 代理人 俞润体
主权项 1、一种生物大分子组分相分离法,其特征在于:是以纯化质粒DNA为目的的相分离,对需要分离的物质预处理,并按如下操作工序:1)凝集:加足够量的缓冲溶液温和混匀,所述的缓冲溶液是缓冲溶液为硫酸铵或氯化铯380~480克,磷酸二氢钠14~18克,加水至1升;2)分相:加分相溶液温和混匀,离心,成上下两相,相间及下相沉淀;其中脂质在上相,蛋白质在相间沉淀,DNA质粒、病毒核酸、线粒体DNA在下相,总RNA在下相沉淀;基因组DNA或在下相或与蛋白质在相间共沉淀;所述的分相溶液是为乙醇∶异丙醇之体积比=2~10∶1;溶液体系pH值为5~6.7。
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