一种含持家基因的双重反转录聚合酶链式反应方法

摘要

一种含持家基因的双重反转录聚合酶链式反应方法。设计引物使目标基因扩增产物比持家基因扩增产物解链温度低，或目标基因引物比持家基因引物解链温度高，通过控制前期循环的变性温度或退火温度，使持家基因扩增流产而目标基因经扩增得到富集。当目标基因模板数量与持家基因相当时控制变性或退火温度使持家基因也开始扩增，最终目标扩增产物量与持家基因扩增产物量趋于接近。

主权项

1，一种含持家基因的双重反轉錄聚合酶链式反应方法，反应液含一对擴增持家基因的引物和一對擴增目標基因的引物。該雙重反轉錄PCR反应依次包括如下步骤：(1)反转录合成cDNA(2)DNA模板变性解链；(3)引物与模板退火；(4)在DNA聚合酶催化下延伸合成互补DNA链；(5)按步骤(2)-(4)循环进行扩增反应；其特徵在于反應1至20循環内部份循環只有目標基因的擴增而無持家基因的擴增。