| 主权项 |
1.一种多孔性载体,包含交联的胶原蛋白、醣胺素 及透明质酸,其具有90-95%的孔隙度与50-300m的孔 洞大小。 2.如申请专利范围第1项之多孔性载体,其中该胶原 蛋白为第二型胶原蛋白。 3.如申请专利范围第2项之多孔性载体,其中该第二 型胶原蛋白来自牛或猪。 4.如申请专利范围第1项之多孔性载体,其中该醣胺 素为硫酸化软骨素(chondroitin sulfate, CS)、硫酸化肝 素(heparin sulfate, HS)硫酸化角质素(keratan sulfate, KS) 与硫酸化皮肤素(dermatan sulfate, DS),或其混合物。 5.如申请专利范围第4项之多孔性载体,其中该硫酸 化软骨素系双醣单元(unit)为1至20的硫酸化软骨素A 、B或C。 6.如申请专利范围第4项之多孔性载体,其中该硫酸 化肝素系双醣单元(unit)为1至20的硫酸化肝素。 7.如申请专利范围第1项之多孔性载体,其中该透明 质酸具有一介于5000至5 x 106的分子量。 8.如申请专利范围第7项之多孔性载体,其中该透明 质酸具有一介于1 x 104至1 x 106的分子量。 9.如申请专利范围第1项之多孔性载体,其中用于交 联的交联剂为1-乙基-3-(3-二甲胺丙基)碳二醯亚胺( (1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide))。 10.如申请专利范围第1项之多孔性载体,其中用于 交联的交联剂为京尼平(genipin)。 11.如申请专利范围第1项之多孔性载体,其系由包 含下列步骤的方法制备:将含有醣胺素及透明质酸 的胶原蛋白溶液置入于一个模具内,经由冷冻乾燥 使该胶原蛋白溶液于该模具内成形一纤维载体,再 将成形的纤维载体浸于一含有交联剂的溶液中进 行交联。 12.如申请专利范围第11项之多孔性载体,其中该模 具的内部具有圆柱型、方型、不规则型或薄膜之 三度空间立体形状。 13.如申请专利范围第11项之多孔性载体,其中该成 形体为圆柱型,而且具有介于7.9mm至9.2mm之直径,及 介于4.3mm至9.3mm之厚度。 14.一种多孔性载体之制备方法,包含下列步骤: 将胶原蛋白二型溶解于含醋酸的水溶液中,并与透 明质酸及选自硫酸化软骨素、硫酸化肝素、硫酸 化角质素、硫酸化皮肤素及它们之混合物所组成 群组的醣胺素均匀混合;将所获得的混合液注入模 具固定成形,经冷冻乾燥形成一纤维载体;除去该 纤维载体所残留之醋酸;及将该纤维载体浸于一含 有交联剂的溶液中进行交联。 15.如申请专利范围第14项之制备方法,其中该冷冻 乾燥系在-20℃或更低的温度进行。 16.如申请专利范围第15项之制备方法,其中该冷冻 乾燥系利用不同冰冻温度-20℃、-80℃或-196℃制备 不同孔洞大小之纤维载体。 17.如申请专利范围第14项之制备方法,其中该纤维 载体被浸泡于含交联剂的酒精水溶液中进行交联 反应。 18.如申请专利范围第17项之制备方法,其中该纤维 载体被浸泡于含交联剂的酒精水溶液中在37℃下 进行48小时的交联反应。 19.如申请专利范围第14项之制备方法,其中该纤维 载体具有蜂窝状或层状的表面结构,及其内部具有 多孔性相互连通网状结构。 20.如申请专利范围第14项之制备方法,其中该除去 该纤维载体所残留之醋酸的步骤包含将该纤维载 体浸于酒精水溶液。 21.如申请专利范围第14项之制备方法,其中该硫酸 化软骨素系双醣单元(unit)为1至20的硫酸化软骨素A 、B或C。 22.如申请专利范围第14项之制备方法,其中该硫酸 化肝素系双醣单元(unit)为1至20的硫酸化肝素。 23.如申请专利范围第14项之制备方法,其中该透明 质酸具有一介于5000至5 x 106的分子量。 24.如申请专利范围第23项之制备方法,其中该透明 质酸具有一介于1 x 104至1 x 106的分子量。 25.如申请专利范围第14项之制备方法,其中该交联 剂为1-乙基-3-(3-二甲胺丙基)碳二醯亚胺((1-ethyl-3-( 3-dimethylaminopropyl)carbodiimide))。 26.如申请专利范围第14项之制备方法,其中该交联 剂为京尼平(genipin)。 图式简单说明: 图一表示本发明之胶原蛋白二型载体180倍之SEM放 大图,其表面结构为蜂窝状与层状结构(无HA、CS,冰 冻温度-20℃)。 图二表示本发明以不同冰冻温度制备胶原蛋白二 型之多孔性载体(无HA、CS),(A)-20℃;(B)-80℃;(C)-196℃ 。 图三(a)表示本发明之COL II/CS/HA多孔性复合载体之 外观,其系以京尼平作为交联剂进行交联。 图三(b)表示本发明之COL II/CS/HA多孔性复合载体之 外观,其系以EDC作为交联剂进行交联。 图四(a)表示以不同交联剂交联载体之软骨细胞生 长情形结果图。其中EDC COL I代表胶原蛋白第一型 载体以EDC交联,GP COL II代表胶原蛋白第二型载体以 GP交联,及GP COL I代表胶原蛋白第一型载体以GP交联 。 图四(b)表示以不同交联剂交联载体之软骨细胞生 化合成结果图。其中EDC COL I代表胶原蛋白第一型 载体以EDC交联;GP COL II代表胶原蛋白第二型载体以 GP交联,及GP COL I代表胶原蛋白第一型载体以GP交联 。 图五(a)表示本发明之不同COL II/HA/CS复合载体其软 骨细胞生长情形结果图,其中BTCS代表:COL II+HA+CS(长 链段,十个双醣单元(unit)以上);CSCA8代表:COL II+HA+CS( 短链段,4个双醣单元);COL II代表不含HA、CS的胶原 蛋白第二型载体。 图五(b)表示本发明之不同COL II/HA/CS复合载体其软 骨细胞生化合成情形结果图,其中BTCS代表:COL II+HA+ CS(长链段,十个双醣单元(unit)以上);CSCA8代表:COL II+ HA+CS(短链段,4个双醣单元);COL II代表不含HA、CS的 胶原蛋白第二型载体。 图六(a)表示本发明之COL II/HA/CS复合载体,培养软骨 细胞之H&E染色图。 图六(b)表示本发明之COL II/HA/CS复合载体,培养软骨 细胞艾尔逊蓝染色剂之染色图。 |
