采用碱基序列测定法比较同一基因在不同来源中的表达量的方法

摘要

本发明涉及一种用于定量比较同一基因在不同来源中的表达量的分析法，它利用生物发光法的定量特性和逐个加入不同的三磷酸脱氧核糖核苷(dNTP)的原理，定量比较同一基因在不同来源组织或细胞间的基因表达量差异。具体步骤为：将不同来源的信使核糖核酸(mRNA)反转录成cDNA，并在各来源cDNA中标记一段来源特异性DNA序列；将经标记的各来源cDNA混合于一管中，作为聚合酶链反应(PCR)的底物；用一个共用引物和一个基因特异性引物进行PCR扩增；采用生物发光分析法测定碱基序列，其中碱基种类代表基因的不同来源，信号强度代表各来源中基因表达量。该方法对疾病相关基因的筛选、对临床早期诊断和创制治疗疾病的特效药具有重大意义。

主权项

1、一种采用碱基序列测定法比较同一基因在不同来源中的表达量的方法，它具有如下特征：(a)用DNA序列标记法使不同来源的信使核糖核酸(mRNA)的反转录产物互补DNA(cDNA)中含有一段来源特异性序列；(b)将经标记的各来源cDNA混合于一管中，作为聚合酶链反应(PCR)的底物，用一个共用引物和一个基因特异性引物进行PCR扩增；(c)用生物发光分析法测定上述PCR扩增产物中与基因来源相对应的一段碱基序列，以碱基种类代表基因的不同来源，其信号强度代表各来源中基因表达量。