分离纯化肿瘤细胞的方法及试剂盒

摘要

一种分离纯化肿瘤细胞用试剂盒，包括：制备肿瘤细胞悬浮液的消化剂，用于悬浮肿瘤细胞的悬浮剂，包含在分离容器中用于肿瘤细胞分离纯化的分离剂和用于过滤消化后细胞的细胞滤器。所述消化剂的成分包括：胰蛋白酶、胶原酶I、胶原酶IV或它们的混合物，所述悬浮液的成分包括：稳定细胞环境pH值的缓冲剂，所述分离剂的比重介于：1.020－1.025之间，其成分包括无机盐、氨基酸、维生素和细胞因子，所述分离容器包括容量介于15ml－50ml的试管/离心管，所述细胞滤器的孔径为70－100μm。采用该试剂盒，可快速简便、兼容性好、所获细胞纯度高、成活率高、分离纯化成本低并且安全地实现肿瘤细胞的分离纯化。

主权项

1、一种分离纯化肿瘤细胞的方法，其特征在于，包括以下步骤：①.制备肿瘤细胞悬浮液：如果采用肿瘤组织块，使用消化剂在一定温度条件下处理一预定时间形成细胞消化液，再将该细胞消化液通过细胞滤器过滤，即得含肿瘤细胞的悬浮液；如果采用肿瘤腔间积液，则将该腔间积液直接通过细胞滤器过滤，收集细胞滤过液，加入悬浮液与这些细胞滤过液混匀，即得含肿瘤细胞的悬浮液；②.在第一容器中加入分离剂，并将所述含肿瘤细胞的悬浮液加到该容器中的分离剂的顶部；③.将所述第一容器竖直静置一预定时间后，于该容器的底端处取出一预定体积比例的含肿瘤细胞的分离剂，并置于第二容器中；④.将所述盛有含肿瘤细胞的分离剂的第二容器进行离心处理，去除上清，沉淀部分即为纯化的肿瘤细胞。