一种从牛初乳中工业化分离纯化乳铁蛋白的方法

摘要

一种从牛初乳中工业化分离纯化乳铁蛋白的方法，属于牛初乳中乳铁蛋白的工业化分离纯化技术领域。本发明是以牛初乳脱脂乳清为原料，采用酶法去除酪蛋白，膜分离技术和工业色谱技术相结合，从牛初乳中工业化分离纯度为90％以上的乳铁蛋白，涉及膜分离技术和工业色谱技术等现代生物集成技术在农产品深加工中的应用，本发明方法适合工业化规模应用，其优点是快速有效、成本适中、高纯度、高回收率。本发明对于促进乳制品的深加工及初乳资源的综合利用，提高我国人民特别是婴幼儿的健康水平，研究和开发功能性食品配料都具有重要的意义。

主权项

1.一种从牛初乳中工业化分离纯化乳铁蛋白的方法，其特征是以牛初乳脱脂乳清为原料，采用酶法去除酪蛋白，膜分离技术和工业色谱技术相结合，从牛初乳中工业化分离纯度为90％以上的乳铁蛋白；(1)酶法去除酪蛋白：在牛初乳脱脂乳清中，加入皱胃酶液，皱胃酶的活力为2000U/mL，添加量为100kg牛初乳脱脂乳清中加入该酶液50mL，加酶量控制在使初乳10-15min凝固为宜，将反应体系的pH调节至6.0，酶反应温度为40°C，初乳凝固后保温30min，离心去除酪蛋白后所得上清液即为酶法乳清；(2)预过滤：将所得酶法乳清通过囊式微滤器澄清，去除残留的酪蛋白胶粒；(3)分步超滤：采用板式膜组件和醋酸纤维素膜材料、以错流方式操作的超滤系统，首先选用截留相对分子质量为150kDa的超滤膜进行第一步超滤，收集透过液，再选用截留相对分子质量为10kDa的超滤膜进行第二步超滤，超滤工艺参数为：切向流速3-4L/min，临界操作压力0.10-0.15MPa，操作温度45-55℃，截留浓缩液即为乳铁蛋白粗制品；(4)工业色谱纯化：选用SP Sepharose Fast Flow强阳离子交换剂，装柱，柱尺寸为φ7.0×20cm，以pH值为7.7～8.0、10mmol/L的磷酸盐为起始平衡缓冲液，截留浓缩液上样，洗脱速度2L/h，先采用0.5mol/L的NaCl溶液洗脱其它组分，至洗脱吸收值回复至基线水平，再采用1mol/L的NaCl溶液洗脱乳铁蛋白组分，至洗脱吸收值再次回复至基线水平作为洗脱结束，收集该乳铁蛋白组分的洗脱液，经超滤脱盐、浓缩和冷冻干燥，得到乳铁蛋白精制品。