用于测定高半胱氨酸的方法和组合物

摘要

本发明一般涉及高半胱氨酸检测领域。特别是，本发明提供一种测定样品中高半胱氨酸的存在或浓度的方法，该方法包含：在Hcy转化反应中将含有或怀疑含有Hcy的样品与Hcy共底物和Hcy转化酶接触以形成Hcy转化产物和Hcy共底物转化产物；和评估Hcy共底物转化产物以确定样品中Hcy的存在、不存在和/或数量。本发明还提供了基于相同原理测定高半胱氨酸的试剂盒。

主权项

1.一种在没有色谱分离的情况下测定样品中的高半胱氨酸(Hcy)的方法，该方法包含：a)在Hcy转化反应中将含有或怀疑含有Hcy的样品与Hcy共底物和Hcy转化酶接触以形成Hcy转化产物和Hcy共底物转化产物，其中所述Hcy共底物是S-腺苷甲硫氨酸(SAM)，所述Hcy转化酶是S-腺苷甲硫氨酸(SAM)-依赖性高半胱氨酸S-甲基转移酶，所述Hcy转化产物是甲硫氨酸(Met)并且所述Hcy共底物转化产物是S-腺苷-L-高半胱氨酸(SAH)；b)通过将所述SAH与SAH水解酶接触，由SAM生成Hcy和腺苷(Ado)，以评估步骤(a)中生成的所述Hcy共底物转化产物SAH，所述Hcy通过SAM-依赖性高半胱氨酸S-甲基转移酶循环至所述Hcy转化反应中以形成基于Hcy共底物的酶循环反应体系，评估所述Ado以确定样品中Hcy的存在、不存在和/或数量。