| 主权项 |
1.几丁寡糖制备方法，其特征在于其步骤为：1)菌株培养和酶液制备将菌株豚鼠气单胞菌在培养基中培养；然后将培养得到的发酵菌液离心分离，得到发酵液上清，再用超滤法去除酶液中残余菌体和其他固形物，分离得到酶液备用；2)制备几丁质胶体(1)、将几丁质与无机酸混合，制成几丁质酸溶液，按重量与体积配比，几丁质∶无机酸＝1∶8～20，其中几丁质的单位为Kg，无机酸的单位为L；(2)、将几丁质酸溶液滴加到水或碱溶液中，使其胶体沉淀，成为胶状液；(3)、将几丁胶与含几丁寡聚糖的无机盐肥料分离；(4)、将分离后的几丁胶用水洗涤，即得几丁质胶体；3)酶解反应在酶反应罐中，将几丁质胶体混悬于浓度为20mM的缓冲液中，配制成终浓度为几丁质干重0.1％～10％的几丁质胶体溶液，蒸汽灭菌后冷却至室温，将步骤1)得到的几丁质酶液无菌传输至灭过菌的酶反应罐体内的几丁质胶体溶液中，保温，得几丁寡糖酶解液；4)一级膜分离待步骤3)所获得的几丁寡糖酶解液中几丁质胶体的固相成份含量降低至0.05％～2％时，将几丁寡糖酶解液从酶反应罐泵入微滤膜分离装置，压力控制范围为0.15～0.8MPa，温度控制范围为10～50℃，除去酶解液中的悬浮物、几丁质胶体和部分有机物，未透过的部分返回酶反应罐继续参与酶解，透过液为活性几丁寡糖滤液，经管道进入二级膜分离料罐；5)二级膜分离二级膜分离选用超滤膜分离装置，以压力为推动力，操作压力控制范围为0.3～1.5MPa，温度控制范围为10～50℃，分离分子量范围为2,000～20,000Da，透过超滤膜的含活性几丁寡糖透过液进入三级膜分离料罐进行产品的进一步分离纯化；6)三级膜分离三级膜分离采用纳滤膜分离装置，膜分离的截留分子量为800～2,000Da，操作压力控制范围为0.5～5.0MPa，pH为2.5～7.5，将截留的浓缩液喷雾干燥后得到活性几丁寡糖及低聚糖混合物产品，透过液进入四级膜分离料罐；7)四级膜分离四级膜分离采用纳滤膜分离装置，分离的截留分子量为100～300Da，操作压力控制范围为0.5～5.0MPa，pH为2.5～7.5，将截留的浓缩液喷雾干燥后得到活性几丁寡糖产品，透过液主要含单糖、二糖和水，作为副产品。 |
