| 主权项 |
1、一种单个微生物细胞进行观察的方法，它包括下列步骤：A、制备琼脂糖凝胶：先称取0.02～0.2克的琼脂糖粉，然后溶解于10毫升的双蒸水中，经过115℃30分钟或121℃20分钟灭菌，琼脂糖凝胶冷却至38～42℃，保温待用；B、微生物细胞悬液的制备：首先接种单菌落至培养基中，活化微生物细胞至稳定期，然后转接细胞至培养基中继续培养，当细胞生长至对数期或稳定期时取出含有细胞的培养液待用；C、微生物细胞悬液和琼脂糖凝胶混合液的制备：琼脂糖凝胶和微生物细胞悬液分别按照步骤A和B进行，琼脂糖凝胶和微生物细胞悬液体积比为10比1到1比10，于三角烧瓶中震摇，得到一种混合液；D、将混合液倒于载物片上：在一块普通载玻片材料切出2块1.0厘米×2.5厘米的玻璃条和2块0.7厘米×3.0厘米的玻璃条，然后将4块玻璃条粘附在完整的普通载玻片上，形成工形凹槽，在工形凹槽中央刻出蚀刻线，然后将步骤C制备得到的混合液用移液器吸取2～3毫升点加在载物片的工形槽上，压上盖玻片，混合液将填满工形槽，之后静置于超净工作台内，冷却至25～30℃；E、将上述混合液和载物片固定于显微镜上，进行操作和观察：在上述混合液冷却至25～30℃后，将载物片移至显微镜的载物台上，并用透明胶固定；F、观察及更换细胞溶液：使用显微镜、照相机和电脑组成的系统对固定微生物细胞进行单个的观察和拍照，在载物片工形槽的一边用滤纸吸取原溶液，在另 一边补充替换溶液。 |
