金耳栽培种制备方法

摘要

本发明是一种金耳栽培种制备方法。其特征在于按以下步骤进行：经菌种的培养-金耳栽培种组分之一毛韧革菌的固体培养和液体培养；金耳栽培种组分之二金耳酵母状孢子的试管种培养、液体种子培养、摇床培养和发酵罐培养；金耳栽培种组分一和组分二的混合；段木栽培和袋料栽培或瓶栽培的过程。由于将金耳栽培中的金耳菌和伴生菌毛韧革菌分别培养，金耳菌和伴生菌能充分均匀地混合，使得金耳的酵母状孢子能充分萌发，这样使用本发明的菌种不会出现金耳栽培中常出现的段木上生长大量的毛韧革菌子实体的情况，使用本发明的菌种段木栽培金耳时出菇率在95％以上，产量增加15～20％；使用本发明的金耳液液菌种，金耳菌与伴生菌混合均匀，金耳时发菌快、吃料快，污染率低，出菇率达100％，转色快，生长周期短。

主权项

1、一种金耳栽培种的制备方法，其特征在于按以下步骤进行，所用原料以重量百分比计：1)菌种的培养：a、金耳栽培种组分之一毛韧革菌的固体培养：将20～28℃培养5～10天的毛韧革菌试管种接种在固体培养基上培养，20～28℃培养30～45天。试管种培养基为PDA，固体培养基为栎木木屑70％，麦麸20％，黄豆粉5％，玉米粉5％；b、金耳栽培种组分之一毛韧革菌的液体培养：将20～28℃培养5～10天的毛韧革菌试管种接种在液体种子培养基中，20～28℃培养5～10天后，将培养种按培养基量的5～10％的比例接于摇床或发酵罐培养基中，摇床培养条件为20～28℃，100～200rpm，培养时间5～7天，发酵罐培养条件为通气0.5～2L/min，100～300rpm搅拌20～28℃培养5～8天；试管种培养基为PDA，液体种子培养基为5～10％黄豆粉，5～10％玉米粉，0.05～0.2％磷酸氢二钾，0.05～0.2％硫酸镁，水余量；摇床或发酵罐培养的培养基为10～15％黄豆粉，10～15％玉米粉，栎木锯末5～10％，0.05～0.2％磷酸氢二钾，0.05～0.2％硫酸镁，水余量；c、金耳栽培种组分之二金耳酵母状孢子的试管种培养：将金耳酵母状孢子接种在改进的PDA培养基斜面上，20～2℃培养7～10天，改进的PDA培养基为10％马铃薯煮液加0.05～0.2％酵母粉或膏，0.05～0.2％蛋白胨，0.05～0.2％磷酸氢二钾，0.05～0.2％硫酸镁，2％葡萄糖或蔗糖；d、金耳栽培种组分之二金耳酵母状孢子的液体种子培养：在5～10％黄豆粉、5～10％玉米粉、0.05～0.2％磷酸氢二钾、0.05～0.2％硫酸镁中加入水余量，搅拌均匀分装在三角瓶中灭菌后冷却，接入试管种，20～28℃100～300rpm摇床培养3～10天；e、金耳栽培种组分之二的摇床培养：在5～15％黄豆粉、5～15％玉米粉、5～10％栎木锯末、0.05～0.2％磷酸氢二钾、0.05～0.2％硫酸镁中加入水余量，搅拌均匀分装在三角瓶中121℃灭菌30～60分钟，冷却至35℃，接入培养基量的5～10％的步骤d所得种子，20～28℃、100～300rpm摇床培养5～8天；f、金耳栽培种组分之二的发酵罐培养：在5～15％黄豆粉、5～15％玉米粉、5～10％栎木锯末、0.05～0.2％磷酸氢二钾、0.05～0.2％硫酸镁中加入水余量，搅拌均匀装在发酵罐中，121℃灭菌30～60分钟，冷却至35℃，接入培养基量的5～10％的上一步所得种子，通气0.5～2L/min，100～300rpm搅拌20～28℃培养5～8天；2)金耳栽培种组分一和组分二的混合：a、组分之一的固体培养物与组分之二的摇床或发酵罐培养物按2∶1～1∶2比例混合，室温条件下放置5～10天，得金耳栽培种之一金耳固液菌种，该菌种即可接种段木、瓶和袋；b、组分之一的液体培养物与组分之二的摇床或发酵罐培养物按2∶1～1∶2比例混合，室温下放置1～3天，得金耳栽培种之二金耳液体菌种，即可接种袋或瓶；3)栽培a、段木栽培：选好段木按现行的段木栽培方法打孔，接种金耳固液菌种，管理方法同一般的固体菌种；b、袋料栽培或瓶栽培：按一般金耳袋料栽培或瓶栽培制好栽培料，每瓶或袋接种金耳液液菌种3～5％，接种后在20～28℃培养，40～48天菌丝长满瓶或袋，此时按自然温度培养18～22天，在瓶或袋内建2cm以上的金耳子实体时移入出菇房管理。