发明名称 蛋白水解裂解和纯化重组蛋白的方法
摘要 本发明涉及通过提供适于亲和纯化的融合蛋白的高价值异源蛋白的蛋白纯化的改进方法以及融合蛋白的蛋白水解裂解的改进和经济的方法。这些方法可用于由植物、获自植物的组织或植物细胞大规模生产纯化的重组蛋白。本发明目的在于减少成本和改进在植物及其它生物生产系统产生的异源蛋白的下游加工的质量。
申请公布号 CN1842600A 申请公布日期 2006.10.04
申请号 CN200480024617.1 申请日期 2004.08.27
申请人 奥夫莱夫塔埃克尼公司 发明人 埃纳尔·门蒂莱;比约登·拉鲁斯·奥瓦尔
分类号 C12N15/82(2006.01);C12N15/62(2006.01);C12N9/64(2006.01) 主分类号 C12N15/82(2006.01)
代理机构 中原信达知识产权代理有限责任公司 代理人 杨青;樊卫民
主权项 1.纯化目的异源蛋白的方法,包括(a)提供了包含融合于由蛋白水解切割位点截断的CBM的融合蛋白,(b)在促进所述蛋白酶蛋白水解裂解的条件下,将所述融合蛋白与融合于CBM的功能性蛋白酶接触,从目的异源蛋白裂解CBM,(c)在其中CBM-蛋白酶和游离的CBM结合于所述多糖基质且其中目的异源蛋白不保持在所述多糖基质上的条件下,将CBM-蛋白酶,游离的CBM和目的异源蛋白的溶液与多糖基质接触,(d)由多糖基质分离未-结合的目的异源蛋白,(e)用一或多种合适的水溶液冲洗具有结合的CBM-蛋白酶和CBM的多糖基质,(f)通过调整影响所述CBM-蛋白酶由基质释放的条件由基质洗脱CBM-蛋白酶;和(g)任选地复原所述洗脱的CBM-蛋白酶,来保持其与所述多糖基质的亲合性,使得复原的CBM-蛋白酶可再用于随后步骤(a)-(b)方法的重复。
地址 雷克雅未克冰岛