主权项 |
1、一种盆栽红掌苗组培快繁方法,其特征在于:它主要包括以下步骤:(一)愈伤组织的诱导(1)取红掌完全展开2~5天的幼嫩叶片作为外植体;(2)将所述叶片先用75%酒精处理15秒、再在0.1%升汞溶液中处理7~8分钟取出,用无菌水冲洗5次后浸入无菌水中备用;(3)将升汞处理后的所述叶片用加有BA2.5mg/l和2,4-D 2.0mg/l的预处理液处理20分钟;(4)将预处理后的所述叶片切成0.6cm×0.6cm的叶片切块,将所述叶片切块放入无菌水中备用;(5)将所述叶片切块并成批接种于诱导培养基上进行培养,接种时保持所述叶片切块的叶面向上,所述诱导培养基为加有6-BA 1.0mg/l、2.4-D 0.1mg/l的改良MS,所述改良MS为1/2MS大量元素和常量其他MS成分;(6)培养温度为23~27℃,先在连续黑暗条件下诱导60天,随后逐渐增加光照再生长30~60天,即可在所述叶片切块的边缘诱导出愈伤组织;(二)不定芽的诱导和分化(1)将诱导出的所述愈伤组织置于分化培养基上诱导分化出不定芽,所述分化培养基为加有BA 0.5mg/l、NAA 0.1mg/l的改良MS或加有TDZ 0.02mg/l的改良MS;(2)培养温度为23~27℃、光照为每天12小时;(三)无菌苗的增殖培养将分化出的所述不定芽置于增殖培养基上增殖培养出生根的无菌 苗,所述增殖培养基为加有6-BA0.1~0.5mg/l的1/2MS或加有TDZ0.01~0.02mg/l及0.3%的活性炭的1/2MS;(四)无菌苗的驯化移栽(1)当所述无菌苗长至株高2~4厘米、最大叶宽0.7~0.9厘米且带有2~3条粗壮根时即可进行移栽驯化;(2)移栽前一周打开瓶盖以使所述无菌苗逐步适应外界条件;(3)洗净所述无菌苗根部琼脂并移栽入泥炭土与珍珠岩比例为4∶1的基质内;(4)保持温度为20~28℃、弱光条件,移栽后的第一周用薄膜覆盖,控制湿度为85~95%。 |