发明名称 一种重组蝎昆虫毒素及其可溶性表达和纯化方法
摘要 本发明涉及一种重组蝎昆虫毒素rBmK IT及其可溶性表达和纯化方法。将BmK ITcDNA与一种蛋白自剪接元件(内含肽intein)基因融合表达,并在BmK IT cDNA的3’端融合了编码6个组氨酸的核苷酸序列。诱导表达出的融合蛋白intein-rBmKIT在大肠杆菌中以可溶的形式存在,表达量占菌体总蛋白的20-25%。将工程菌的发酵液经菌体的破碎、蛋白抽提、融合蛋白自剪切与亲和层析、样品浓缩以及高温处理和凝胶过滤层析进行纯化。获得电泳纯的重组蝎昆虫毒素rBmKIT。本发明优点是,重组目的蛋白以可溶的形式存在,避免了繁琐且回收率低的包涵体变复性的方法,简化了纯化步骤。
申请公布号 CN1817902A 申请公布日期 2006.08.16
申请号 CN200610012483.2 申请日期 2006.03.07
申请人 山西大学 发明人 梁爱华;许成钢;范晓军;王伟;柴宝峰;崔大伟
分类号 C07K14/435(2006.01);C07K19/00(2006.01);C12N15/09(2006.01);C12N15/12(2006.01);C12N15/62(2006.01);C12P21/02(2006.01);C07K1/14(2006.01) 主分类号 C07K14/435(2006.01)
代理机构 山西五维专利事务所有限公司 代理人 杨耀田
主权项 1、一种重组蝎昆虫毒素rBmKIT,特征在于其氨基酸序列为:Gly Arg Ala Met Gly Lys Lys Asn Gly Tyr Ala Val Asp Ser Ser GlyLys Val Ser Glu Cys Leu Leu Asn Asn Tyr Cys Asn Asn Ile Cys ThrLys Val Tyr Tyr Ala Thr Ser Gly Tyr Cys Cys Leu Leu Ser Cys TyrCys Phe Gly Leu Asp Asp Asp Lys Ala Val Leu Lys Ile Lys Asp AlaThr Lys Ser Tyr Cys Asp Val Gln Ile Ile Gly His His His His His His ***
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