人羊膜间充质干细胞的分离及培养方法及医用组合物

摘要

本发明为一种人羊膜间充质干细胞的分离及培养方法及医用组合物，分离及培养方法是将人羊膜用胰蛋白酶、胶原酶、脱氧核糖核酸酶相继消化，然后过滤制成单细胞悬液，再采用加有体积百分含量为10％－20％的胎牛血清和终浓度为10－20ng/ml的碱性成纤维生长因子的V_DMEM∶V_F12＝1∶1的DMEM/F12培养基，置于37℃、饱和湿度、体积分数为5％的CO₂培养箱中进行培养，通过换液和传代，使人羊膜间充质干细胞逐渐得到扩增和纯化。本发明方法具有来源广泛，不受伦理限制等优越性，具有广阔的应用前景，本发明的医用组合物可用于神经替代治疗、用于心肌梗塞的治疗、用于糖尿病的治疗、用于骨组织工程、应用于整形外科等。

主权项

1.一种人羊膜间充质干细胞的分离及培养方法，其特征在于包括如下顺序的步骤：(1)取人羊膜先用胰蛋白酶消化，然后用胶原酶、脱氧核糖核酸酶消化，得到细胞悬液；(2)将上一步所得的细胞悬液过滤，制成单细胞悬液；(3)将第(2)步所得细胞接种于培养基中，置于37℃、饱和湿度、体积分数为5％的CO2培养箱中进行培养，并通过换液和传代，使人羊膜间充质干细胞逐渐得到扩增和纯化，所述培养基采用VDMEM∶VF12＝1∶1的DMEM/F12培养基，其中含有体积百分含量为10％-20％的胎牛血清和终浓度为10-20ng/ml的碱性成纤维生长因子。