摘要 |
<p>"PROCESSO MELHORADO PARA A RECUPERAçãO DE VìRUS DE RNA DE FILAMENTO NEGATIVO NãO SEGMENTADO PARTINDO DO CDNA", A presente invenção refere-se ão refere-se aa processos para a produção de vírus de RNA de filamento negativo não segmentados infecciosos da ordem Mononegavirales que envolvem a co-expressão de um CDNA viral junto com as proteínas virais essenciais N, P e L em uma célula hospedeira transfectada de forma transitória com um vetor de expressão que codifica uma RNA polimerase. Nos processos alternativos, após a célula hospedeira ser transfectada com um vetor de expressão do CDNA viral e um ou mais vetores que codificam a RNA polimerase, a proteína N, a proteína P e a proteína L, a célula hospedeira é exposta a um choque térmico eficiente sob condições suficientes para aumentar a recuperação do vírus recombinante. Em outras modalidades alternativas, as células hospedeiras são transferidas após a recuperação viral começar para uma co-cultura com uma célula de expansão de placas, tipicamente uma monocamada de células de expansão e o vírus de RNA de filamento negativo não segmentado infeccioso montado é recuperado da co-cultura. São também fornecidas dentro da invenção, composições para a produção do vírus de RNA de filamento negativo não segmentado infeccioso da Ordem Mononegavirales, vírus recombinantes produzidos utilizando os processos e as composições descritos antedormente e as composições e os processos imunogênicos que empregam o vírus recombinante. Em modalidades adicionais, os processos e as composições da invenção são empregados para a produção de vírus de RNA de filamento negativo não segmentados e partículas subvirais defeituosos em relação ao crescimento ou à replicação.</p> |