METODO NOVEDOSO PARA LA INTEGRACION DE UN ADN FORANEO DENTRO DE GENOMAS DE EUCARIOTAS.

摘要

Proteína recombinante que comprende: una primera recombinasa específica de sitio fusionada en el marco con una segunda recombinasa específica de sitio distinta. Se proporcionan composiciones y métodos para introducir un ADN de interés dentro de un sitio de integración genómica. En particular, los métodos y composiciones implican el uso de una combinación de sitios diana de dos recombinasas específicas de sitio distintas, tales como Cre y FLP, y la expresión de una recombinasa quimérica con especificidad de sitio diana dual. Así, las composiciones comprenden recombinasas específicas de sitio novedosas con especificidades frente a sitios diana múltiples, y las secuencias de nucleótido y los casetes de expresión que codifican para esas recombinasas o sitios diana. Los métodos implican transformar una célula eucariota que tiene sitios diana para la recombinasa novedosa con ADN de interés que está flanqueada por sitios diana correspondientes. La expresión o bien de la recombinasa quimérica novedosa, o bien de dos recombinasas específicas de sitio en la célula eucariota da como resultado la integración del ADN de interés dentro del genoma. Las composiciones y los métodos de la invención hacen uso en la construcción de células eucariotas transformadas de manera estable, y en particular, células vegetales.