主权项 |
1、一种耐热酪氨酸蛋白磷酸酶,它能在pH5.5,75℃条件下特异性水解蛋白中酪氨酸上的磷酸根基团,并具有如下的物理化学特性:(1)分子量:在十二烷基磺酸钠变性聚丙烯酰胺凝胶电泳上约为82.5kDa;(2)等电点:在5%的天然聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳上约为9.5;(3)最适反应温度和最佳反应pH:在酪氨酸上含有磷酸基团的所有蛋白都是该酶蛋白的底物,其最适反应温度为75±1℃,最佳pH为5.5±0.5;(4)热稳定性:此酶蛋白在70℃温育240min对酶活性没有明显影响,当孵育温度为80℃时,随着孵育时间延长酶活性直线下降,当温度超过90℃时,酶活性迅速丧失;(5)抑制剂:N-乙基马来酰亚氨、钼酸根、钒酸盐和二价锌离子都是此酶蛋白的特异抑制剂;(6)酶动力学特性:此酶蛋白的米氏常数Km为1.273±0.083mM,最大酶促反应速度Vmax为8.72±0.12μmol.min-1.mg-1;其中所述酶是从绿僵菌属(Metarhizium anisopliae)金龟子绿僵菌CQMa102(Metarhizium anisopliae var.acridum CQMa102),保藏编号为CGMCC No.0877中提取制得。 |