发明名称 有效提高西洋参悬浮细胞产量的生产工艺
摘要 本发明涉及一种提高西洋参悬浮细胞生长量的简易生产工艺,该工艺包括以下步骤:配制储备液,装瓶,灭菌,制成液体培养基,在无菌条件下接入西洋参对数生长期的悬浮细胞,放入摇床中悬浮暗培养,接种后2-6天,收集悬浮细胞,10-15天后补料,再培养5-10天,收获细胞,提取西洋参人参皂甙,利用该工艺,可使细胞生长量增长近20倍,比对照提高1-3倍,悬浮细胞的生长量可达500-850g/L。
申请公布号 CN1800365A 申请公布日期 2006.07.12
申请号 CN200510048269.8 申请日期 2005.12.31
申请人 河北省生物研究所 发明人 闫静辉;李书生;张小兵;李亚璞;李春生;吴萌;陈英珠;程华;韩广彦;籍宝霞;陈瑞芹;辛春艳
分类号 C12N5/04(2006.01) 主分类号 C12N5/04(2006.01)
代理机构 石家庄新世纪专利商标事务所有限公司 代理人 董金国
主权项 1、一种有效提高西洋参悬浮细胞产量的生产工艺,其特征在于采用以下步骤:(1)配制储备液;(2)配制培养液:在已配制好的储备液中加入去离子水稀释18-22倍,再依次加入白糖、水解乳蛋白、2,4-二氯苯氧乙酸、α-萘乙酸、激动素和吲哚丁酸,,终浓度分别为1.5%-6%、0.3%-1%、0.5-1.5mg/L、0-0.5mg/L、0.2-1.0mg/L和0.2-1.0mg/L,然后调节pH值为5.5-6.5,充分搅拌后装瓶,100ml-500ml三角瓶,装液量为三角瓶容积的1/5-1/2。(3)培养液灭菌:密封瓶口,将温度控制在115-122℃,压力控制在1.0-1.2kg/cm2,灭菌20-30分钟,培养液冷却后备用。(4)接种、培养:制成的培养液中,在无菌条件下接入西洋参对数生长期的悬浮细胞,每升培养液接入15-50克鲜重的悬浮细胞,放入摇床中悬浮暗培养,接种后2-6天收集悬浮细胞,重新接种到新培养液中继续培养,每升培养液中接入15-50克鲜重的悬浮细胞,10-15天后补充培养液,补充量为培养体积的10%-30%,再培养5-10天,收获细胞,提取西洋参人参皂甙。
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