克服由葡萄糖诱发小鼠2－细胞期胚胎体外发育受阻的方法

摘要

本发明公开了一种克服由葡萄糖诱发的小鼠2－细胞期胚胎体外发育受阻的方法，包括以下步骤：a.提供小鼠1－细胞期胚胎；b.培养液的配制：去除了谷氨酰胺的mCZB培养液中，加入葡萄糖和抗氧化剂谷胱甘肽；c.胚胎的液滴培养。本发明以mCZB培养液为基础培养液，通过添加葡萄糖和抗氧化剂谷胱甘肽(GSH)，对葡萄糖在胚胎体外培养中抑制胚胎早期发育的机理实验。在外源性谷胱甘肽对有葡萄糖作用的小鼠胚胎体外发育的影响的实验中，mCZB组、葡萄糖组、葡萄糖+谷胱甘肽组的囊胚发育率分别为51.5％、14.8％和40.7％。实验证明：葡萄糖抑制小鼠胚胎早期发育的作用被GSH克服。

主权项

1、一种克服由葡萄糖诱发的小鼠2-细胞期胚胎体外发育受阻的方法，包括以下步骤：a、提供小鼠1-细胞期胚胎；b、培养液的配制：去除了谷氨酰胺的mCZB培养液中，加入葡萄糖和抗氧化剂谷胱甘肽；c、胚胎的液滴培养：将经过灭菌的培养液置于培养皿中制备液滴，每滴20微升，随即向培养皿中覆盖一层矿物油，完全覆盖液滴，将培养皿放入5％CO2的饱和湿度的二氧化碳培养箱中，在37℃下至少平衡2小时，每个培养液滴中移入约10枚左右经过培养液冲洗的小鼠1-细胞期胚胎。