多重荧光PCR－改良分子信标检测食源性致病菌的方法

摘要

本发明涉及一种多重荧光PCR－改良分子信标检测食源性致病菌的方法，根据待测多种致病菌的特异基因序列设计多对引物和多个改良分子信标探针，采用荧光PCR－改良分子信标扩增待测多种致病菌特异基因的序列，利用分子信标与扩增产物的杂交，检测反应体系的荧光强度，以达到设定的阈值时所需的循环次数Ct值作为结果判断的标准，Ct值为0或40：阴性；Ct小于38：阳性。本发明的方法灵敏度高，特异性强，操作简单，结果观察直观明了，适用于两种、三种和四种等多种细菌的随机组合和多种食源性致病菌的快速同时检测以及大量样品的检验。

主权项

1、一种多重荧光PCR-改良分子信标检测食源性致病菌的方法，其包括以下步骤：(1)根据待测各种致病菌的特异基因序列分别设计多对引物和多个改良分子信标探针；(2)配制荧光PCR-改良分子信标扩增基因序列的反应体系；(3)用步骤(1)的各种荧光PCR-改良分子信标同时扩增待测多种致病菌特异基因的序列；(4)利用分子信标与扩增产物的杂交，检测反应体系的荧光强度，以达到设定的阈值时所需的循环次数Ct值作为结果判断的标准，Ct值为0或40：阴性；Ct小于38：阳性。