桑寄生凝集素的制备方法

摘要

本发明涉及一种桑寄生属植物中凝集素的提取或制备方法，属中草药提取或制备工艺技术领域。本发明方法的特征在于具有以下工艺过程和步骤：(1)将干燥的中草药桑寄生粉碎，用pH 6.0～8.0、浓度0.05～0.5mol/L的磷酸盐缓冲液浸泡6～24h，将此混合物抽滤得棕色滤液；(2)滤液中加入硫酸铵固体，调至饱和度25～75％、静置、低温离心，取上清液；再次加入硫酸铵固体，调至饱和度45～95％，静置、低温离心，取其沉淀物粗蛋白；(3)将沉淀物粗蛋白溶于少量蒸馏水并转移至透析袋中，用磷酸盐缓冲液进行透析，其蛋白的液用微孔滤膜过滤，得滤液；(4)将滤液上琼脂糖亲和柱，用含有半乳糖的磷酸盐冲液洗脱解吸附，分部收集，经冷冻干燥即可得桑寄生凝集粉末。该生物对癌细胞具有明显的抑制作用。

主权项

1.一种桑寄生凝集素的制备方法，其特征在于具有以下的工艺过程和步骤：a.将干燥的中草药桑寄生用粉碎机打成细粉，用含有浓度为0.05～0.5mol/L的氯化钠及pH值为6.0～8.0、浓度为0.05～0.5mol/L的磷酸盐缓冲液浸泡6～24h，在此期间不断搅拌；然后将此混合物用布氏漏斗进行抽滤，得棕色滤液；b.根据上述滤液体积加入硫酸铵固体，充分搅拌调至饱和度达25～75％，静置数小时后，低温离心分离，取其上清液；按该上清液体积再次加入硫酸铵固体，充分搅拌，调至饱和度达45～95％，静置数小时后，低温离心分离，去除上清液，取其沉淀物，即为粗蛋白；c.将上述沉淀物粗蛋白溶于少量蒸馏水并转移至透析袋中，分别用蒸馏水和0.01-0.1mol/L、pH 6.0～8.0的磷酸盐缓冲液进行透析，透析后的蛋白液用微孔滤膜过滤，得到滤液；d.将上述粗蛋白滤液上琼脂糖亲和柱；用琼脂糖4％或琼脂糖6％的亲和柱；琼脂糖亲和柱事先需经0.1～0.5mol/L的盐酸、硫酸或醋酸酸化后装柱；用含有0.05-0.5mol/L半乳糖的磷酸盐缓冲液洗脱解吸附；分部收集，将有凝血活性的各管合并，再经透析去盐和半乳糖后，冷冻干燥，即可制得桑寄生凝集素粉末。