筛选γ－分泌酶抑制剂的方法

摘要

本发明涉及用于测定γ－分泌酶活性的改进方法，该方法的各自组分和所述方法的用途。本发明涉及测定γ－分泌酶活性和检测γ－分泌酶、γ－分泌酶的亚单位蛋白质或者γ－分泌酶样蛋白酶的改进方法；所述方法的具体实施方案一方面涉及鉴定γ－分泌酶和编码γ－分泌酶、γ－分泌酶的亚单位蛋白质或者γ－分泌酶样蛋白酶的cDNA的方法，另一方面涉及鉴定可以抑制γ－分泌酶、γ－分泌酶的亚单位蛋白质或者γ－分泌酶样蛋白酶的活性的物质的方法。此类物质尤其重要，因为它们可以用于例如，作为药学活性化合物，例如，用于治疗阿尔茨海默氏病。

主权项

1.检测γ-分泌酶活性的方法，其中A.使用编码融合蛋白质的转基因，其含有a)第一种核苷酸序列，其编码含有氨基酸序列GAIIGLMVGGVVIATVIVITLVML(SEQ ID NO.1)的蛋白质，b)处于第一种核苷酸序列的5’末端的第二种核苷酸序列，其编码信号肽，c)启动子和，d)如果适宜，其他编码和/或非编码核苷酸序列；B.将该转基因掺入到细胞中并且表达融合蛋白质；C.融和蛋白质在氨基酸序列SEQ ID NO.1内部通过细胞中存在的γ-分泌酶切割，从而形成含有氨基酸序列GAIIGLMVGGVV(SEQ ID NO.2)的第一种部分蛋白质和含有氨基酸序列VIVITLVML(SEQ ID NO.3)的第二种部分蛋白质，D.检测所述第一种部分蛋白质和/或第二种部分蛋白质，所述方法的特征在于除了SEQ ID NO.1外所述融合蛋白质不含有作为胞吞或胞吐和/或蛋白酶切割位点信号的一种或多种肽。