改进的抗lgE抗体以及改进多肽的方法

摘要

本发明涉及一种通过多步组合来调节多肽对靶分子亲和力的方法，该方法包括下列步骤：(1)鉴定倾向于异构化的天冬氨酰基残基；(2)以替换残基替代和筛选所得突变体对靶分子的亲和力。在一个较佳的实例中，替代残基的方法是用噬菌体展示的亲和力成熟法(AMPD)。在另一个较佳的实例中，多肽是抗体，靶分子是抗原。在另一个较佳的实例中，抗体是抗IgE，靶分子是IgE。在另一个实例中，本发明涉及具有对IgE亲和力有所改进的抗IgE抗体。

主权项

1.一种制备经修饰多肽的方法，该多肽是抗IgE抗体，它不表现出天冬氨酰基异构化灭活，它对IgE靶分子有亲和力，该亲和力等于或大于未修饰的多肽，该方法包括下列步骤：a)鉴定所述多肽中倾向于异构化的天冬氨酰基残基，b)通过在编码所述多肽的基因中进行一个或多个密码子的取代、缺失或插入使多肽的氨基酸序列变化，用替换残基替代步骤a)中鉴定的天冬氨酰基残基，以制得一个结构上相关的多肽与噬菌体包被蛋白融合的文库，在含编码该多肽的DNA的噬菌粒颗粒表面上展示各相关多肽的单拷贝，通过噬菌体展示用亲和力成熟来筛选每个多肽对靶分子的亲和力，和c)筛选天冬氨酰基残基已经改变且对靶分子的亲和力等于或高于未修饰多肽的已修饰多肽。