发明名称 |
根癌农杆菌介导的质粒对顶头孢霉的转化方法 |
摘要 |
本发明涉及根癌农杆菌介导的顶头孢霉的转化。本发明提供了构建适用于头孢菌素C产生菌顶头孢霉基因工程研究用的新型载体质粒,并建立了根癌农杆菌Ti质粒介导的转化顶头孢霉的新方法,无论是用菌丝体或是原生质体,每10<SUP>7</SUP>个受体细胞都可得到>100个转化子,与传统的原生质体转化法1~4个转化子相比,转化率得到了明显的提高。有望突破现有载体转化顶头孢霉效率率低这一瓶颈,促进这个重要的工业微生物菌种的基因工程改良,具有极大的工业价值。 |
申请公布号 |
CN1778913A |
申请公布日期 |
2006.05.31 |
申请号 |
CN200410084578.6 |
申请日期 |
2004.11.25 |
申请人 |
上海医药工业研究院 |
发明人 |
朱春宝;朱宝泉;徐威;赵文杰 |
分类号 |
C12N15/09(2006.01);C12N15/80(2006.01);C12N15/87(2006.01);C12N1/21(2006.01) |
主分类号 |
C12N15/09(2006.01) |
代理机构 |
中原信达知识产权代理有限责任公司 |
代理人 |
罗大忱 |
主权项 |
1.一种根癌农杆菌介导的顶头孢霉的转化方法,包括以下步骤:(1)构建重组载体质粒;(2)通过电激法和三亲杂交法将载体质粒导入根癌农杆菌中,构建含有双元载体系统的根癌农杆菌;(3)将含有双元载体系统的根癌农杆菌与顶头孢霉共培养,得到转化子;(4)获得的转化子以耐抗生素进行筛选。 |
地址 |
200040上海市北京西路1320号 |